【检查】马兜铃酸I 照高效液相色谱法(中国药典2020年版通则0512)和质谱法(中国药典2020年版通则0431)测定。
色谱、质谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(色谱柱内径2.1mm);以甲醇为流动相A,以0.1%甲酸溶液(含5 mmol/乙酸铵)为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱,流速为每分钟0.3 ml;采用质谱检测器,电喷雾正离子模式(ESI+),进行多反应监测(MRM),选择m/z 359.0 →298.0和m/z 359.00→ 296.0为检测离子对。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~6 | 70 | 30 |
6~7 | 70→95 | 30→5 |
7~8 | 95 | 5 |
8~9 | 95→70 | 5→30 |
15 | 70 | 30 |
对照品溶液的制备 取马兜铃酸I对照品适量,精密称定,加70 %甲醇制成每1ml含15ng的溶液,作为对照品溶液。
供试品溶液的制备 取本品剪碎,取5g, 精密称定,置50ml具塞锥形瓶中,精密加入70%甲醇25ml,称定重量,回流40分钟,放冷,再称定重量,用70%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别吸取上述对照品溶液和供试品溶液各1 µl,注入高效液相色谱-质谱联用仪,测定,即得。以质荷比m/z 359.0→298.0和m/z 359.0→296.0离子对提取的供试品离子流色谱中,应不得同时出现与对照品色谱保留时间一致的色谱峰;若同时出现,则供试品中m/z 359.0→298.0的色谱峰应小于对照品色谱峰。