【含量测定】 三七 红参 青皮 葛根 甘草 照高效液相色谱法(中国药典2020年版通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充柱(柱长为150mm,内径2.1mm,粒径为3µm);以乙腈为流动相A,以0.1%甲酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;流速:0.3ml/min;柱温:35℃;电喷雾式检测器检测,雾化温度为35℃,数据采集频率为10Hz,过滤常数(F)为1.0(S)。理论板数按葛根素、橙皮苷、人参皂苷Rb1及甘草酸铵峰计,均不得低于10000。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0→60 | 5→90 | 95→10 |
对照品溶液的制备 分别精密称取葛根素对照品、橙皮苷对照品、人参皂苷Rb1对照品及甘草酸铵对照品适量,加70%甲醇分别制成1ml含葛根素1.0mg、橙皮苷0.1mg、人参皂苷Rb1 0.5mg及甘草酸铵1.0mg的对照品溶液,即得。
供试品溶液的制备 取样品适量,剪碎,加入等量硅藻土,研细,取约5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%甲醇25m,称定重量,超声(功率240W,频率30kHz)处理30min,放冷,再称定重量,用70%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,作为供试品溶液。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2μl,注入高效液相色谱仪,测定,记录色谱图。
限度 本品每 1g 含葛根以葛根素(C21H20O9)计,不得少于0.36mg;青皮以橙皮苷(C28H34O15)计,不得少于0.35mg ;含三七、红参以人参皂苷Rb1(C54H92O23)计,不得少于0.22mg;含甘草以甘草酸(C42H62O16)计,不得少于0.19mg(甘草酸重量=甘草酸铵重量/1.0207)。