【含量测定】人参 照高效液相色谱-质谱法(通则0512和通则0431)测定。
色谱、质谱条件与系统适用性试验 以五氟苯基键合硅胶为填充剂(2.1mm×100mm,1.7μm);以2mmol/L甲酸铵溶液为流动相A,乙腈为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;流速为每分钟0.3ml;
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~8 | 75→65 | 25→35 |
8~12 | 65→45 | 35→55 |
12~12.05 | 45→0 | 55→100 |
采用质谱检测器,电喷雾负离子模式(ESI-),多反应监测(MRM),质谱参数见表。
化合物 | 母离子 | 子离子 | CE | |
人参皂苷Rf | 845.60 | 799.50* | -23 | |
101.15 | -50 | |||
人参皂苷Rg1 | 845.60 | 799.40* | -24 | |
637.40 | -30 | |||
人参皂苷Re | 945.70 | 637.30* | -39 | |
119.25 | -47 | |||
人参皂苷Rb1 | 1153.75 | 1107.45* | -23 | |
179.30 | -55 |
混合对照品溶液的制备 精密称取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rf对照品、人参皂苷Rb1对照品适量,加甲醇制成每1ml含人参皂苷Rg1 0.5μg、人参皂苷Re 1.5μg、人参皂苷Rf 0.3μg、人参皂苷Rb1 2μg的混合对照品溶液。
供试品溶液的制备 取本品20片,精密称定,研细,取适量(约1片),精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入50%甲醇25ml,密塞,称定重量,超声处理(功率350W,频率37kHz)45分钟,取出,放冷,再称定重量,用50%甲醇溶液补足减失的重量,摇匀,用0.22μm微孔滤膜滤过,即得。
测定法 分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各2μl,高效液相色谱-质谱联用仪,测定,即得。
本品含人参以人参皂苷Rg1(C42H72O14)和人参皂苷Re(C48H82O18)的总量以及人参皂苷Rb1(C54H92O23)含量、人参皂苷Rf(C42H72O14)含量计,每片含人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的总量不得少于29.7µg,人参皂苷Rb1不得少于19.8µg,人参皂苷Rf不得少于5.3µg。