妇康片中人参皂苷Rf、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的含量测定方法

发布时间:2024-06-24

【含量测定】人参 照高效液相色谱-质谱法(通则0512和通则0431)测定。

色谱、质谱条件与系统适用性试验  以五氟苯基键合硅胶为填充剂(2.1mm×100mm,1.7μm);以2mmol/L甲酸铵溶液为流动相A,乙腈为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;流速为每分钟0.3ml;

时间(分钟)

流动相A(%)

流动相B(%)

0~8

75→65

25→35

8~12

65→45

35→55

12~12.05

45→0

55→100

采用质谱检测器,电喷雾负离子模式(ESI-),多反应监测(MRM),质谱参数见表。

化合物

母离子

子离子

CE

人参皂苷Rf

845.60

799.50*

-23

101.15

-50

人参皂苷Rg1

845.60

799.40*

-24

637.40

-30

人参皂苷Re

945.70

637.30*

-39

119.25

-47

人参皂苷Rb1

1153.75

1107.45*

-23

179.30

-55

混合对照品溶液的制备  精密称取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rf对照品、人参皂苷Rb1对照品适量,加甲醇制成每1ml含人参皂苷Rg1 0.5μg、人参皂苷Re 1.5μg、人参皂苷Rf 0.3μg、人参皂苷Rb1 2μg的混合对照品溶液。

供试品溶液的制备  取本品20片,精密称定,研细,取适量(约1片),精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入50%甲醇25ml,密塞,称定重量,超声处理(功率350W,频率37kHz)45分钟,取出,放冷,再称定重量,用50%甲醇溶液补足减失的重量,摇匀,用0.22μm微孔滤膜滤过,即得。

测定法  分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各2μl,高效液相色谱-质谱联用仪,测定,即得。

本品含人参以人参皂苷Rg1(C42H72O14)和人参皂苷Re(C48H82O18)的总量以及人参皂苷Rb1(C54H92O23)含量、人参皂苷Rf(C42H72O14)含量计,每片含人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的总量不得少于29.7µg,人参皂苷Rb1不得少于19.8µg,人参皂苷Rf不得少于5.3µg。