照高效液相色谱法（通则0512）测定

供试品溶液的制备  精密称取尿素维E乳膏适量（相当于尿素25mg），加75%乙腈水溶液约30ml，置60～70℃水浴中30分钟左右，搅拌使尿素溶解，置冰水浴中冷却，滤过，滤液转移置100ml量瓶中，加75%乙腈水溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

对照品溶液  精密称取尿素对照品50mg，置50ml量瓶中，加75%乙腈水溶液溶解并稀释至刻度，作为尿素对照品储备液。精密称取缩二脲对照品约10mg，加75%乙腈水溶液稀释至刻度，作为缩二脲对照品溶液。精密称取缩三脲对照品约10mg，加75%乙腈水溶液稀释至刻度，作为缩三脲对照品溶液。

系统适用性溶液  分别精密量取尿素对照品储备液、缩二脲对照品溶液和缩三脲对照品溶液各1ml分别置10ml容量瓶中，加75%乙腈水溶液稀释至刻度，作为系统适用性溶液。

色谱条件  色谱柱：Waters XBridge BEH Amide，4.6×150mm，5µm；以乙腈-水（90:10）为流动相；检测波长190nm；进样体积10µl。

系统适用性要求  缩三脲、缩二脲、尿素之间的分离度应符合要求。

测定法  精密量取供试品溶液与对照品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。

限度  按外标法以峰面积计，缩二脲、缩三脲限度均不得过0.2%。