照高效液相色谱法（通则0512）测定

色谱条件与系统适用性试  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-2%冰乙酸水溶液（50：50）为流动相；流速每分钟1.0ml；以荧光检测器检测，激发波长λex=333nm，发射波长λem=477nm。理论板数以赭曲霉毒素A计应不低于4000。

对照品溶液的制备 精密称取赭曲霉毒素A对照品适量，用甲醇制成浓度为每lml含2.5ng的溶液，即得。

供试品溶液的制备  取小活络丸适量，剪碎，精密称取样品5g，置具塞锥形瓶中，加入3g氯化钠，再精密加入25ml 80%甲醇溶液，浸置1小时，时时振摇，超声30分钟（频率44kHz，功率500W），离心10分钟（离心速度4000r/min）。精密量取上清液15ml置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，离心10分钟（离心速度4000r/min），精密量取上清液20ml，通过免疫亲合柱，流速每分钟3ml，先用淋洗缓冲液（称取25.0氯化钠、5.0碳酸氢钠溶于水中，加入0.1ml吐温20，用水稀释至1L）10ml洗脱，再用10ml水洗脱，弃去洗脱液，使空气进入柱子，将水挤出柱子，再用1.5ml甲醇洗脱，收集洗脱液置2ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.22μm）滤过，作为供试品溶液。

测定法  分别精密量取上述对照品溶液5μl、10μl、15μl、20μl、25μl、30μl，注入色谱仪，测定峰面积，以对照品的进样量为横坐标，以峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线。另精密吸取上述供试品溶液20~50μl，注入液相色谱仪，测定峰面积，从标准曲线上读出供试品中相当于插曲霉毒素A的量，计算，即得

本品含赭曲霉毒素A不得过100ng/g。