1.人参再造丸(大蜜丸)中总蒽醌含量测定方法
大黄、制何首乌 照高效液相色谱法(通则0512)测定
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(100mm×2.1mm,1.6μm);以甲醇为流动相A,0.1%磷酸溶液为流动相B,按下表中的梯度洗脱;流速0.3ml/min;检测波长为437nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于3000。
时间(分钟) | 流动相A | 流动相B |
0~11 | 45 | 55 |
11~26 | 45→56 | 55→44 |
26~43 | 56→73 | 44→27 |
43~50 | 73 | 27 |
对照品溶液的制备 精密称取芦荟大黄素对照品、大黄酸对照品、大黄素对照品、大黄酚对照品、大黄素甲醚对照品适量,加甲醇分别制成每1ml含芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚各80μg,大黄素甲醚40μg的溶液;分别精密量取上述对照品溶液各2ml,混匀,即得(每1ml中含芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚各16μg,含大黄素甲醚8μg)。
供试品溶液的制备 取重量差异项下本品,剪碎,混匀,取约10g,精密称定,置具赛锥形瓶中,精密加入甲醇100ml,密塞,称定重量,加热回流1小时,放冷,再称定重量 ,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液50ml,减压回收至干,残渣加水20ml,超声处理5分钟(功率500W,频率40kHz)使溶解,加盐酸2ml、三氯甲烷20ml,加热回流3小时,放冷,分取三氯甲烷液,水液再用三氯甲烷振摇提取3次,每次10ml,合并三氯甲烷液,加少量无水硫酸钠脱水,蒸干,残渣加甲醇适量使溶解,转移至5ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液3μl与供试品溶液1~3μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品每丸含大黄、制何首乌以芦荟大黄素(C15H10O5)、大黄酸(C15H8O6)、大黄素(C15H10O5)、大黄酚(C15H10O4)、大黄素甲醚(C16H12O5)的总量计,不得少于0.57mg。
2.人参再造丸(浓缩丸)中总蒽醌含量测定方法
大黄、制何首乌 照高效液相色谱法(通则0512)测定
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(100mm×2.1mm,1.6μm);以甲醇为流动相A,0.1%磷酸溶液为流动相B,按下表中的梯度洗脱;流速0.3ml/min;检测波长为437nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于3000。
时间(分钟) | 流动相A | 流动相B |
0~11 | 45 | 55 |
11~26 | 45→56 | 55→44 |
26~43 | 56→73 | 44→27 |
43~50 | 73 | 27 |
对照品溶液的制备 精密称取芦荟大黄素对照品、大黄酸对照品、大黄素对照品、大黄酚对照品、大黄素甲醚对照品适量,加甲醇分别制成每1ml含芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚各80μg,大黄素甲醚40μg的溶液;分别精密量取上述对照品溶液各2ml,混匀,即得(每1ml中含芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚各16μg,含大黄素甲醚8μg)。
供试品溶液的制备 取重量差异项下本品,研细,取15g,精密称定,置具赛锥形瓶中,精密加入甲醇50ml,密塞,称定重量,加热回流1小时,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液10ml,减压回收至干,残渣加水20ml,超声处理5分钟(功率500W,频率40kHz)使溶解,加盐酸2ml、三氯甲烷20ml,加热回流30分钟,放冷,分取三氯甲烷液,水液再用三氯甲烷振摇提取3次,每次10ml,合并三氯甲烷液,加少量无水硫酸钠脱水,蒸干,残渣加甲醇适量使溶解,转移至10ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液3μl与供试品溶液1~3μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品每1g含大黄、制何首乌以芦荟大黄素(C15H10O5)、大黄酸(C15H8O6)、大黄素(C15H10O5)、大黄酚(C15H10O4)、大黄素甲醚(C16H12O5)的总量计,不得少于0.14mg。