有关物质参照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部通则0512)测定。
供试品溶液临用新制。取本品适量,加流动相A溶解并稀释制成每1ml中约含头孢米诺1.0mg的溶液。
对照溶液精密量取供试品溶液适量,用流动相A定量稀释制成每1ml中约含头孢米诺2μg的溶液。
灵敏度溶液精密量取对照溶液适量,用流动相A定量稀释制成每1ml中约含头孢米诺0.2μg的溶液。
系统适用性溶液1 取杂质1、杂质2、杂质3、杂质4、杂质5和头孢米诺各适量,加流动相A溶解并稀释制成每1ml中约含杂质1、杂质2、杂质3、杂质4、杂质5各2μg和头孢米诺1.0mg的溶液,作为系统适用性溶液1。
系统适用性溶液2取本品适量,在105℃放置1小时,取粉末适量,加流动相A溶解并稀释制成每1ml中约含头孢米诺1.0mg的溶液,作为系统适用性溶液2。
色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.010mol/L磷酸二氢铵缓冲溶液(用磷酸调节pH值至2.0)-乙腈(96:4)为流动相A,以乙腈为流动相B,按下表进行线性梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,柱温25℃,检测波长254nm,进样体积20μl。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0 | 100 | 0 |
5 | 100 | 0 |
25 | 92 | 8 |
30 | 92 | 8 |
55 | 60 | 40 |
60 | 60 | 40 |
61 | 100 | 0 |
70 | 100 | 0 |
系统适用性要求系统适应性溶液1的色谱图中,头孢米诺的保留时间约为22分钟~30分钟,杂质1、杂质2、杂质3、杂质4、杂质5依次洗脱,头孢米诺峰与杂质3峰分离度应不小于2.0。系统适用性溶液2的色谱图中,相对保留时间1.6之后的峰为聚合物杂质峰。灵敏度溶液的色谱图中,主成分峰高的信噪比应大于10。
测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。
限度供试品溶液的色谱图中如有杂质峰,杂质1、杂质2、杂质3、杂质4、杂质5的峰面积均不得大于对照溶液主峰面积(0.2%),聚合物杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的1.5倍(0.3%),其他单个未知杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍(0.1%),各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的7.5倍(1.5%),小于灵敏度溶液主峰面积的峰忽略不计。
附:系统适用性溶液1图谱
系统适用性溶液1的典型色谱图(色谱柱:Kromasil C18,4.6×250mm,5μm)
头孢米诺:25.95min;杂质1:5.21min;杂质2:11.70min;
杂质3:27.90min;杂质4:24.23min;杂质5:18.84min;
附:系统适用性溶液2图谱
系统适用性溶液2的典型色谱图(色谱柱:Kromasil C18,4.6×250mm,5μm)
头孢米诺:24.52min 聚合物杂质:≥41.297min