大黄碳酸氢钠片中总蒽醌与薄荷脑的含量测定检验方法

发布时间:2024-06-20
总蒽醌 照高效液相色谱法(通则0512)测定。
供试品溶液  取本品10片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于大黄0.15g),置于具塞锥形瓶中,精密加入甲醇40mL,称定质量,加热回流1小时,放冷,再称定质量,用甲醇补足减失的质量,摇匀,滤过。精密量取续滤液5mL,置于锥形瓶中,水浴挥干溶剂,加5mol/L盐酸溶液10mL,超声处理2分钟,再加三氯甲烷20mL,加热回流1小时,放冷,置分液漏斗中,用少量三氯甲烷洗涤容器,并入分液漏斗中,分取三氯甲烷层,酸液再用三氯甲烷提取3次,每次10mL,合并三氯甲烷液,回收溶剂至干,残渣精密加入甲醇10ml使溶解,滤过,取续滤液。
混合对照品溶液  精密称取芦荟大黄素对照品、大黄酸对照品、大黄素对照品、大黄酚对照品、大黄素甲醚对照品适量,加甲醇分别制成每1ml含大黄素甲醚、大黄酸、大黄素各0.04mg,大黄酚0.1mg,芦荟大黄素0.02mg的溶液;分别精密量取上述对照品溶液各5ml,置50ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,配制成每1ml中含大黄酸、大黄素、大黄素甲醚各4μg,含大黄酚10μg,含芦荟大黄素2μg的溶液。
色谱条件  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-0.1%磷酸溶液(75:25)为流动相;检测波长为254nm;进样体积10μl,柱温25℃。  
系统适用性要求  混合对照品溶液色谱图中各组分的分离度应符合要求,理论板数按大黄素峰计算应不低于3000。
测定法  精密量取供试品溶液与混合对照品溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。按外标法以峰面积计算,含总蒽醌以芦荟大黄素(C15H10O5)、大黄酸(C15H8O6)、大黄素(C15H10O5)、大黄酚(C15H10O4)和大黄素甲醚(C16H12O5)的总量计。
薄荷油 照气相色谱法(通则0521)测定。
供试品溶液  取本品10片,置50mL离心管中,加水15ml使崩解,精密加入20ml庚烷振摇30min,离心,取上清液。
对照品溶液  精密称取薄荷脑对照品约50mg,置50ml容量瓶中,用庚烷溶解并稀释至刻度,摇匀,再精密吸取适量稀释成0、40、80、120、160、200μg/ml的系列对照品溶液。
色谱条件  以改性聚乙二醇为固定相的毛细管柱(柱长为30m,内径为0.25mm,膜厚度为0.25μm);起始温度为60℃,维持 4分钟,再以每分钟1.5℃的速率升温至130℃,再以每分钟20℃的速率升温至200℃;进样口温度为250℃;检测器温度为300℃;分流比:10:1;进样量5μl。
系统适用性要求  理论板数按薄荷脑计算应不低于5000。
测定法  精密量取供试品溶液与对照品溶液,分别注入气相色谱仪,记录色谱图。按外标法以峰面积计算薄荷脑(C10H20O)含量。