苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸钾、羟苯乙酯 照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部通则0512)测定。
供试品溶液 精密量取本品1ml,置于10ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。
对照品溶液 取苯甲酸、山梨酸钾、羟苯乙酯对照品适量,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中分别含苯甲酸、山梨酸钾、羟苯乙酯100μg、30μg、20μg的溶液。
色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;0.02mol/L磷酸二氢钠,磷酸调pH值3.7)为流动相A,甲醇为流动相B,梯度洗脱,洗脱程序详见“表1梯度洗脱表”;流速为1.0ml﹒min-1;柱温为30℃;采用双波长检测,苯甲酸以228nm为检测波长,山梨酸钾、羟苯乙酯以255nm为检测波长;进样体积为10μl。
表1 梯度洗脱表
时间(min) | A(%) | B(%) |
0.0 | 65 | 35 |
25.0 | 65 | 35 |
26.0 | 56 | 44 |
36.0 | 56 | 44 |
37.0 | 46 | 54 |
67.0 | 46 | 54 |
68.0 | 10 | 90 |
75.0 | 10 | 90 |
76.0 | 65 | 35 |
85.0 | 65 | 35 |
测定法 精密量取对照品溶液与供试品溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。
限度 按外标法以峰面积计算,含苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸钾、羟苯乙酯应为处方量的90.0%~110.0%。