金青感冒颗粒品种多组分含量测定项目检验方法

发布时间:2024-06-20

方法 照高效液相色谱法(中国药典2020年版通则0512)和质谱法(中国药典2020年版通则0413)测定。

色谱、质谱条件与系统适用性实验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(2.7μm,2.1×100mm);以甲醇为流动相A,含0.01 mol/L甲酸铵的0.1%甲酸为流动相B,梯度洗脱(0~2 min,15% A;2~10 min,15% A→47% A;10~15 min,47% A→98% A;15~18 min,98% A);流速:每分钟0.3mL;采用质谱检测器,电喷雾离子源(ESI),正负离子扫描,多反应监测模式(MRM),各对照品的质谱参数见表7。取对照品溶液,进样1µl,按表1中离子对测定的MRM色谱峰的信噪比均应大于10:1。

表1 金青感冒颗粒中各对照品保留时间和主要质谱参数

化合物

tR

(min)

MS1

m/z

MS2

m/z

DP

(V)

CE

(eV)

大豆苷元

10.96

255.1

199.2

148

35

10.96

255.1

181.1

148

43

染料木素

12.22

271.1

153.1

159

35

12.22

271.1

215.2

159

35

橘皮素

14.69

373.2

358.1

196

31

14.69

373.2

343.1

196

30

(R,S)-告依春

1.47

130

70.2

60

19

1.47

130

96.2

60

13

靛玉红

14.76

261.1

157.1

-111

-42

14.76

261.1

217.1

-111

-34

新绿原酸

1.4

353.1

191.1

-63

-22

1.4

353.1

179

-63

-28

绿原酸

2.48

353.1

191.1

-73

-24

2.48

353.1

179

-73

-24

隐绿原酸

2.81

353.1

191.2

-78

-34

2.81

353.1

179.1

-78

-23

迷迭香酸

9.15

359.1

161.2

-76

-21

9.15

359.1

197

-76

-25

大豆苷

5.86

415.1

252.1

-172

-37

5.86

415.1

223.1

-172

-61

甘草苷

7.05

417.1

254.9

-152

-31

7.05

417.1

134.9

-152

-36

染料木苷

7.51

431.1

269

-135

-31

7.51

431.1

238.9

-135

-62

牡荆素

7.62

431.1

311.1

-128

-32

7.62

431.1

283.1

-128

-43

荭草苷

6.84

447.2

327.1

-124

-33

6.84

447.2

357.2

-124

-30

异荭草苷

7.2

447.2

357.2

-150

-33

7.2

447.2

327.1

-150

-32

槲皮苷

10.04

447.2

300.1

-139

-39

10.04

447.2

271.2

-139

-61

异槲皮苷

8.86

463.1

300

-110

-32

8.86

463.1

271.1

-110

-62

金丝桃苷

8.69

463.2

300.1

-146

-42

8.69

463.2

254.9

-146

-55

柚皮芸香苷

8.24

579.2

271.1

-189

-33

8.24

579.2

151

-189

-57

甘草酸铵

14.52

821.5

351.2

-161

-58

14.52

821.5

645.5

-161

-62

芦丁

8.9

609.1

300

-156

-51

8.9

609.1

271.2

-156

-73

橙皮苷

9.01

609.2

301.2

-127

-36

9.01

609.2

325.2

-127

-41

对照品溶液的制备  精密称取上述对照品各10mg,分别置100ml量瓶中,加70%甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,制成各成分质量浓度分别为100µg/ml的贮备液。

精密量取牡荆素、槲皮苷、芦丁、大豆苷元、橘皮素、(R,S)-告依春贮备液各1ml,置10ml量瓶中,加70%甲醇稀释至刻度,摇匀。精密量取上述溶液及靛玉红、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、迷迭香酸、大豆苷、甘草苷、染料木苷、荭草苷、异荭草苷、异槲皮苷、金丝桃苷、柚皮芸香苷、甘草酸铵、橙皮苷、染料木素贮备液各1ml,置100ml量瓶中,加70%甲醇稀释至刻度,摇匀,作为混合对照品溶液(st1000)。

分别精密量取混合对照品溶液各8、6、4、2、1ml,分别置10ml量瓶中,加70%甲醇稀释至刻度,摇匀,作为系列混合对照品溶液。(分别记为st800、st600、st400、st200、st100)。

供试品溶液的制备  精密称取本品约1袋的量,精密加入70%甲醇50ml,称定重量,超声提取30分钟,放冷,加70%甲醇补足重量,滤过,滤液作为供试品溶液。 

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 1µl,注入液相色谱-质谱联用色谱仪,测定,即得。