【检查】 矮壮素 助壮素 照高效液相色谱-质谱法（通则0512和通则0431）测定。
色谱、质谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充柱（2.1×150mm，1.6μm）；以0.1％甲酸（含5mmol/L 甲酸铵）溶液为流动相A，以95%乙腈溶液（含5mmol/L甲酸铵、0.1％甲酸）为流动相B，按下表进行梯度洗脱；流速：0.3 ml/min；柱温：40℃。
时间(分钟) | 流动相A | 流动相B |
0～1 | 90% | 10% |
1～5 | 90%→66% | 10%→34% |
5～8 | 66%→63% | 34%→37% |
8～8.5 | 63%→55% | 37%→45% |
8.5～15 | 55%→25% | 45%→75% |
15～15.1 | 25%→0% | 75%→100% |
15.1～20 | 0% | 100% |
采用三重四极杆质谱检测器，电喷雾离子化（ESI）正离子模式下多反应监测（MRM），监测离子对见下表：
测定成分 | 定量离子对m/z | 定性离子对m/z |
矮壮素 | 122.1→58.2 | 122.1→63.1 |
助壮素 | 114.1→98.1 | 114.1→70.2 |
对照品储备液的制备 精密吸取对照品溶液（50 μg/ml）1ml，置10ml容量瓶中，加乙腈溶解并稀释至刻度，作为对照品贮备溶液（5 μg/ml），于-20℃冰箱中密封、避光保存，于使用前回复至室温。
基质混合对照品溶液的制备 取空白基质样品3g，同供试品溶液的制备方法处理制成空白基质溶液10ml。精密量取上述混合对照品储备液80µl，加空白基质溶液920µl，摇匀，即得基质混合对照品溶液1号（浓度400 µg/L）。再精密量取基质混合对照品溶液1号0.5ml，加空白基质溶液0.5ml，摇匀，即得浓度200 µg/L的对照品溶液。同法制备浓度分别为100µg/L、50µg/L、25µg/Lg、10µg/L、5µg/L、2µg/L、1µg/L的溶液，即得系列基质混合对照品溶液。（标示浓度分别为1、2、5、10、25、50、100、200、400 ng/ml）
供试品溶液的制备 取本品（药材及饮片）粉末（过三号筛）约3g或配方颗粒3g，精密称定，置具塞离心管中，加入1%的冰醋酸溶液15ml，涡旋使药粉充分浸润，放置30分钟，精密加入乙腈15 mL，涡旋混匀，置振荡器上剧烈振荡（3000 r/min）5分钟，于冰浴中冷却10分钟（或冷藏放置30分钟），加入无MgSO4（经马弗炉600℃脱水）6g，立即摇散，再置振荡器上剧烈振荡（3000 r/min）5分钟，离心（4000 r/min）5分钟，用微孔滤膜（0.22 µm）滤过，取续滤液，即得。
测定法 分别精密吸取供试品溶液和不同浓度基质混合对照品溶液各2μl，注入高效液相色谱-质谱联用仪，以对照品峰面积为纵坐标，对照品浓度为横坐标制备标准曲线。从标准曲线读出供试品溶液中相当于矮壮素和助壮素的量，计算即得。
