有关物质 照高效液相色谱法（中国药典2020年版四部通则0512）测定。

供试品溶液  取本品，加0.01mol/L盐酸溶液溶解并稀释制成每1ml中约含多西环素0.5mg的溶液。

对照品溶液  取多西环素对照品适量，精密称定，加0.01mol/L盐酸溶液溶解并稀释制成每1ml中含多西环素5μg的溶液。

系统适用性储备溶液  取杂质A、杂质B及杂质E对照品各适量，加0.01mol/L盐酸溶液溶解并稀释制成每1ml中分别约含杂质A80μg、杂质B和杂质E各25μg的混合溶液。

系统适用性溶液  取样品约50mg,置10ml量瓶中，加0.01mol/L盐酸溶液2ml使溶解，于80℃水浴中加热40分钟，取出冷却至室温，加系统适用性储备液1ml,加0.01mol/L盐酸溶液稀释至刻度。

空白辅料溶液  取维生素C、甘露醇适量，加0.01mol/L盐酸溶液溶解并稀释制成每1ml中约含维生素C 2.4mg、甘露醇2.5mg的混合溶液。

色谱条件  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（pH值适用范围应大于9，

250mm×4.6mm,5μm或效能相当的色谱柱）；以醋酸盐缓冲液[0.25mol/L醋酸铵溶液-0.1mol/L乙二胺四醋酸二钠溶液-三乙胺(100:10:1),用冰醋酸或氨水调节pH值至8.8]-乙腈(87:13)为流动相；柱温为35℃;检测波长为280nm；进样体积20μl。

系统适用性要求 在系统适用性溶液记录的色谱图中，出峰顺序依次为糠醛、杂质E、杂质C、杂质B、杂质A、多西环素与杂质F，各色谱峰之间的分离度均应符合要求。

测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。

限度 供试品溶液色谱图中如有杂质峰，按加校正因子的主成分外标法以峰面积计算各杂质的标示含量。小于对照品溶液主峰峰面积1/20（0.05%）的杂质忽略不计。各杂质的相对保留时间和限度见下表。