照高效液相色谱（中国药典2020年版通则0512）和质谱法（中国药典2020年版通则0431）测定。

色谱、质谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（色谱柱内径2.1mm）；以乙腈为流动相A，0.1%甲酸溶液为流动相B，按表1中的规定进行梯度洗脱；流速为0.35ml/min；柱温：40℃；采用质谱检测器，电喷雾正离子模式（ESI⁺），进行多反应监测（MRM），选择质荷比m/z 613.00→451.10和m/z 613.00→211.00作为定量离子对。

表1  梯度洗脱程序

对照品溶液的制备  取羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1ml含200μg的溶液作为母液，以母液配制系列校准溶液。

供试品溶液的制备  取血府逐瘀丸（大蜜丸，其他丸剂，颗粒，片剂，软胶囊）粉碎（软胶囊取内容物），取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷至室温，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml，置10ml量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各3ul，注入高效液相色谱-质谱联用仪，测定，记录色谱图，用外标法计算，即得。