有关物质  照高效液相色谱法（通则0512）测定。临用新制。

溶剂 流动相A-甲醇（90:10）

供试品溶液 取本品，精密称定，加溶剂溶解并定量稀释制成每1ml中约含头孢哌酮0.5mg的溶液。

对照溶液 精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀。

对照品溶液  取杂质A对照品适量，精密称定，先加乙腈适量溶解后，再用溶剂定量稀释制成每1ml中含7.5µg的溶液。

系统适用性溶液  取头孢哌酮对照品、杂质A对照品（先用乙腈溶解）、杂质B对照品、杂质C对照品、头孢哌酮S异构体对照品及双母核二聚体对照品适量，加少量磷酸盐缓冲液（取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液39.0ml与0.2mol/L磷酸氢二钠溶液61.0ml，混匀，用磷酸调节pH值至7.0）溶解，再用溶剂稀释制成每1 ml中约含头孢哌酮0.5mg与各杂质5µg的混合溶液。

色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（Waters Xbridge C18柱，4.6mm×15cm，5µm或效能相当的色谱柱）；以磷酸氢二铵溶液（取磷酸氢二铵1.76g，加水至1L，用磷酸溶液调节pH值至2.5）为流动相A，甲醇为流动相B，流速为1.0ml/min，按下表线性梯度洗脱；检测波长为254nm；进样体积20μl。

系统适用性要求 系统适用性溶液色谱图中，按杂质C、杂质A、头孢哌酮、头孢哌酮S异构体、杂质B和双母核二聚体的顺序出峰，头孢哌酮峰与头孢哌酮S异构体峰的分离度应符合要求。

测定法 精密量取供试品溶液、对照溶液与对照品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。

限度 供试品溶液色谱图中如有杂质峰，含杂质A按外标法以峰面积计算，不得过标示量的1.5%，杂质B与杂质C按校正后的峰面积计算（分别乘以校正因子0.75与0.44），均不得大于对照溶液主峰面积（1.0%），双母核二聚体杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.4倍（0.4%），其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的1.5倍（1.5%），除杂质A外，其他各杂质峰面积的和按校正后的峰面积计算不得大于对照溶液主峰面积的3.0倍（3.0%），小于对照溶液主峰面积0.05倍的峰忽略不计。

附：

杂质A

C₂₃H₂₃N₅O₈S  529.52

(5R, 6R)-6-[[(2R)-2-[[(4-乙基-2,3-二氧代哌嗪-1-基)甲酰基]氨基]-2-(4-羟基苯基)乙酰基]氨基]-5α, 6-二氢-3H, 7H-氮杂环丁二烯并[2,1-b]呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-1,7(4H)-二酮

杂质B

C₂₅H₂₇N₉O₈S₂  645.67

(6R, 7R)-7-[[(2R)-2-[[(4-乙基-2,3-二氧代哌嗪-1-基)甲酰基]氨基]-2-(4-羟基苯基)乙酰基]氨基]-6α, 7-二氢-3-[(4-甲基-5-硫代-4,5-二氢-1H-四唑-1-基)甲基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸

杂质C

C₂H₄N₄S  116.15

1-甲基-5-巯基四氮唑

双母核二聚体

C₃₅H₃₇N₁₅O₁₀S₄  956.02 

(6R, 7R)-7-[(6R, 7R)-7-[(R)-2-(4-乙基-2,3-双氧哌嗪-1-甲酰胺)-2-(4-羟基苯基)乙酰胺基]-3-[[(1-甲基-1-H-四唑-5-基)硫]甲基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酰胺基]-3-[[(1-甲基-1H-四唑-5-基)硫]甲基]-8-氧代-5硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸