【含量测定】 游离氨基酸 采用氨基酸分析仪进行测定。
供试品溶液 取本品20片,精密称定,研细,精密称取细粉适量(约相当于脑蛋白水解物100mg),置50ml量瓶中,加0.02mol/L盐酸溶液适量,超声约20分钟使脑蛋白水解物溶解,用0.02mol/L盐酸溶液稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,作为供试品贮备液;精密量取1ml,置5ml量瓶中,用0.02mol/L盐酸溶液稀释至刻度,摇匀。
对照品溶液 取相应的氨基酸对照品(见下表)适量,精密称定,加0.02mol/L盐酸溶液适量使溶解,并定量稀释制成与供试品溶液中各氨基酸浓度相当的溶液。
测定法 按外标法以峰面积计算谷氨酸、其他氨基酸含量总和(以氮计,折算系数见下表)。
氨基酸名称 | 氮(N)折算系数 |
门冬氨酸(C4H7NO4) | 0.1052 |
苏氨酸(C4H9NO3) | 0.1176 |
丝氨酸(C3H7NO3) | 0.1333 |
谷氨酸(C5H9NO4) | 0.0952 |
脯氨酸(C5H9NO2) | 0.1217 |
甘氨酸(C2H5NO2) | 0.1866 |
丙氨酸(C3H7NO2) | 0.1572 |
缬氨酸(C5H11NO2) | 0.1196 |
甲硫氨酸(C5H11NO2S) | 0.0939 |
异亮氨酸(C6H13NO2) | 0.1068 |
亮氨酸(C6H13NO2) | 0.1068 |
酪氨酸(C9H11NO3) | 0.0773 |
苯丙氨酸(C9H11NO2) | 0.0848 |
赖氨酸(C6H14N2O2) | 0.1916 |
组氨酸(C6H9N3O2) | 0.2708 |
精氨酸(C6H14N4O2) | 0.3216 |
肽 照游离氨基酸项下的方法测定。
总氨基酸供试品溶液 精密量取游离氨基酸项下供试品贮备液1ml,加盐酸1ml,充氮密封,置110℃水解20小时,放冷,启封,水浴蒸干或吹氮气至干,精密加0.02mol/L盐酸溶液5ml使溶解,混匀,滤过,取续滤液。
对照品溶液 见游离氨基酸项下。
测定法 按外标法以峰面积计算各氨基酸含量总和(以氮计)。以总氨基酸含量减去游离氨基酸含量,即为肽含量。