复方脑蛋白水解物片中游离氨基酸与肽含量测定方法

发布时间:2024-06-19

【含量测定】 游离氨基酸  采用氨基酸分析仪进行测定。

供试品溶液  取本品20片,精密称定,研细,精密称取细粉适量(约相当于脑蛋白水解物100mg),置50ml量瓶中,加0.02mol/L盐酸溶液适量,超声约20分钟使脑蛋白水解物溶解,用0.02mol/L盐酸溶液稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,作为供试品贮备液;精密量取1ml,置5ml量瓶中,用0.02mol/L盐酸溶液稀释至刻度,摇匀。

对照品溶液  取相应的氨基酸对照品(见下表)适量,精密称定,加0.02mol/L盐酸溶液适量使溶解,并定量稀释制成与供试品溶液中各氨基酸浓度相当的溶液。

测定法  按外标法以峰面积计算谷氨酸、其他氨基酸含量总和(以氮计,折算系数见下表)。

氨基酸名称

氮(N)折算系数

门冬氨酸(C4H7NO4

0.1052

苏氨酸(C4H9NO3

0.1176

丝氨酸(C3H7NO3

0.1333

谷氨酸(C5H9NO4

0.0952

脯氨酸(C5H9NO2

0.1217

甘氨酸(C2H5NO2

0.1866

丙氨酸(C3H7NO2

0.1572

缬氨酸(C5H11NO2

0.1196

甲硫氨酸(C5H11NO2S)

0.0939

异亮氨酸(C6H13NO2

0.1068

亮氨酸(C6H13NO2

0.1068

酪氨酸(C9H11NO3

0.0773

苯丙氨酸(C9H11NO2

0.0848

赖氨酸(C6H14N2O2

0.1916

组氨酸(C6H9N3O2

0.2708

精氨酸(C6H14N4O2

0.3216

  照游离氨基酸项下的方法测定。

总氨基酸供试品溶液  精密量取游离氨基酸项下供试品贮备液1ml,加盐酸1ml,充氮密封,置110℃水解20小时,放冷,启封,水浴蒸干或吹氮气至干,精密加0.02mol/L盐酸溶液5ml使溶解,混匀,滤过,取续滤液。

对照品溶液  见游离氨基酸项下。

测定法  按外标法以峰面积计算各氨基酸含量总和(以氮计)。以总氨基酸含量减去游离氨基酸含量,即为肽含量。