含量测定  照高效液相色谱法（中国药典2020年版四部通则0512）测定。

溶剂 水-乙腈-甲酸（500∶500∶1）

内标溶液  取对羟基苯甲酸乙酯适量，精密称定，加溶剂溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.4mg的溶液。

供试品溶液  取本品5瓶，分别加水0.5ml使溶解，将内容物转移至同一10ml量瓶中，并用少量水冲洗小瓶与胶塞，冲洗液转移至量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置25ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀（20mg规格）；取本品5瓶，分别加水1ml使溶解，将内容物转移至同一20ml量瓶中，并用少量水冲洗小瓶与胶塞，冲洗液转移至量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置25ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀（40mg规格）；取本品5瓶，分别加水2ml使溶解，将内容物转移至同一25ml量瓶中，并用少量水冲洗小瓶与胶塞，冲洗液转移至量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml，置25ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀（125mg规格）；取本品5瓶，分别加水4ml使溶解，将内容物转移至同一50ml量瓶中，并用少量水冲洗小瓶与胶塞，冲洗液转移至量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml，置25ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀（250mg规格）；取本品5瓶，分别加水8ml使溶解，将内容物转移至同一100ml量瓶中，并用少量水冲洗小瓶与胶塞，冲洗液转移至量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml，置25ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀（500mg规格）。精密量取该溶液及内标溶液各5ml，置50ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀。

对照品溶液  取琥珀酸甲泼尼龙对照品适量，精密称定，加溶剂溶解并定量稀释制成每1ml中约含2.5mg的溶液，精密量取该溶液及内标溶液各5ml，置50ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀。

系统适用性溶液  取17-羟基-21醛、甲泼尼龙、泼尼松龙-21-半琥珀酸酯、甲泼尼龙-17-半琥珀酸酯、17-脱氧-21-醛、17-酮甲泼尼龙、21-甲基甲泼尼龙^*、11-酮甲泼尼龙-21-半琥珀酸酯、甲基氢化可的松-21-半琥珀酸酯、甲泼尼龙-17,21-二琥珀酸酯、甲泼尼龙-21-醋酸酯、E MATTOX醛、Z MATTOX醛、琥珀酸甲泼尼龙甲酯、二聚体和琥珀酸甲泼尼龙对照品各适量，精密称定，加溶剂溶解并定量稀释制成每1ml中约含琥珀酸甲泼尼龙2.5mg、其他各成分均为10μg的混合溶液。

色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为水-乙腈-甲酸（915:85:1），流动相B为乙腈-四氢呋喃-二氧六环-甲酸（925:47:35:1），按下表进行梯度洗脱；流速为每分钟0.5ml；检测波长为254nm；柱温为55℃；进样体积2μl。

系统适用性要求 系统适用性溶液色谱图中，各成分色谱峰的分离度均应不低于1.0。

测定法  精密量取供试品溶液与对照品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。按内标法以峰面积计算，并乘以0.7891（甲泼尼龙与琥珀酸甲泼尼龙的换算因子为0.7891）。