氧氟沙星滴耳液中抑菌剂项目检验方法

发布时间:2024-06-19

羟苯甲酯、羟苯乙酯、羟苯丙酯、羟苯丁酯、苯扎氯铵、苯扎溴铵、山梨酸、苯甲酸钠、苯甲醇与三氯叔丁醇(根据所使用的抑菌剂选择测定)  照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部通则0512)测定。

供试品溶液  取本品,充分摇匀,即得。

苯甲醇贮备液  取苯甲醇对照品约50mg,精密称定,置25ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀。

三氯叔丁醇、苯扎溴铵、苯扎氯铵贮备液  分别取三氯叔丁醇、苯扎溴铵和苯扎氯铵对照品约60mg、10mg、12mg,精密称定,分别置10ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,分别作为各成分贮备液。

苯甲酸钠、山梨酸、羟苯甲酯、羟苯乙酯、羟苯丙酯和羟苯丁酯贮备液  分别取苯甲酸钠、山梨酸、羟苯甲酯、羟苯乙酯、羟苯丙酯和羟苯丁酯对照品各约10mg,精密称定,分别置25ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,分别作为各成分贮备液。

混合对照品溶液(1)  精密量取上述苯甲醇、苯甲酸钠、三氯叔丁醇贮备液各2ml,再精密量取羟苯甲酯、羟苯乙酯、羟苯丙酯、羟苯丁酯、苯扎溴铵贮备液各1ml,置同一20ml量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀。

混合对照品溶液(2)  精密量取山梨酸贮备液2ml和苯扎氯铵贮备液1ml,置同一20ml量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀。

色谱条件  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以1%三乙胺溶液(用磷酸调节pH值至3.0)为流动相A,以甲醇为流动相B,按下表进行梯度洗脱;流速1.0mL/min;柱温35;检测波长为214nm和256nm;进样体积20μL。

时间(min)

流动相A(%)

流动相B(%)

0

50

50

2

50

50

17

10

90

25

10

90

26

50

50

34

50

50

系统适用性要求  在256nm波长下,羟苯甲酯、羟苯乙酯、羟苯丙酯、羟苯丁酯峰之间及山梨酸与苯扎氯铵峰之间的分离度均应符合要求;在214nm波长下,苯甲醇、苯甲酸钠、三氯叔丁醇、苯扎溴铵峰之间及山梨酸与苯扎氯铵峰之间的分离度均应符合要求。

测定法  精密量取供试品溶液与混合对照品溶液(1)、(2),分别注入液相色谱仪,记录色谱图。

限度  按外标法以峰面积分别计算,供试品中含各类抑菌剂的量,应为标示量的80.0%~120.0%。