【含量测定】 人参 照高效液相色谱-质谱法(中国药典2020年版四部通则0512和通则0431)测定
色谱、质谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(100mm*2.1mm*1.8μm),以甲醇为流动相A,0.1%甲酸水溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;流速为0.3ml/min;柱温为25℃。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0 | 20 | 80 |
40 | 60 | 40 |
40.1 | 95 | 5 |
45.0 | 95 | 5 |
采用三重四级杆质谱检测器,电喷雾离子化正离子模式(ESI+)下多反应监测(MRM);检测离子对见下表:
对照品 | 母离子 | 子离子 | Fragmentor(v) | CE(v) |
人参皂苷Re | 969.6 | 203.0(定量) | 255 | 56 |
969.6 | 349.5 | 255 | 64 | |
人参皂苷Rg1 | 824.0 | 202.9(定量) | 220 | 44 |
824.0 | 643.5 | 220 | 40 | |
人参皂苷Rb1 | 1131.6 | 365.0(定量) | 185 | 64 |
1131.6 | 790.0 | 185 | 40 |
对照品溶液的制备 取人参皂苷Re、Rg1、Rb1对照品适量,精密称定,加阴性样品的供试品溶液稀释制成1ml分别含100ng、100ng、150ng的混合溶液,即得。
供试品溶液的制备 精密量取本品5ml,通过D101型大孔吸附树脂柱(内径为1.5cm,柱高为10cm),以5%乙醇50ml洗脱,弃去洗脱液,继用75%乙醇60ml洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣加甲醇溶解并转移至25ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液与各2μl,注入高效液相色谱-质谱联用仪,测定,即得。
本品每1ml含人参以人参皂苷Rg1(C42H72O14)和人参皂苷Re(C48H82O18)的总量计不得少于18µg,含人参皂苷Rb1(C54H92O23)计不得少于12µg。