【检查】 山麦冬皂苷B 照高效液相色谱-质谱法(中国药典2020年版四部通则0512和通则0431)测定。
色谱、质谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(色谱柱内径为2.1mm),以乙腈为流动相A,以0.1%乙酸(含10mmol/L乙酸铵)溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;流速为每分钟0.3ml;柱温为40℃。采用质谱检测器,电喷雾正离子模式(ESI+),扫描方式:多反应监测(MRM),选择m/z 723.6→415.2和m/z 723.6→269.2作为检测离子对。取对照品溶液,进样2μl,按上述离子对测定的MRM 色谱峰的信噪比均应大于10:1。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~7 | 50→90 | 50→10 |
7~8 | 90 | 10 |
8~8.5 | 90→50 | 10→50 |
8.5~16 | 50 | 50 |
对照品溶液的制备 取山麦冬皂苷B对照品适量,精密称定,加甲醇制成1ml含70ng的溶液,即得。
供试品溶液的制备 精密取本品1ml,置5ml量瓶中,加无水乙醇稀释至刻度,摇匀,滤过,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各2μl,注入高效液相色谱-质谱联用仪,测定,即得。
判定原则(1)供试品的提取离子流色谱中,未同时出现与对照品溶液色谱相应的色谱峰,视为未检出;(2)供试品的提取离子流色谱中,同时出现与对照品溶液色谱相应的色谱峰,且供试品色谱中m/z 723.6→415.2的色谱峰面积值小于对照品溶液中相应的峰面积值,视为未检出;(3)供试品的提取离子流色谱中,同时出现与对照品溶液色谱相应的色谱峰,且供试品色谱中m/z 723.6→415.2的色谱峰面积值大于对照品溶液中相应的峰面积值,视为检出。
结果判定 供试品的提取离子流色谱中,应不得检出与对照品溶液色谱相应的色谱峰。