【检查】微生物限度

TAMC方法适用性试验

取静置1min后的1:100供试液上清液，按1mL/膜至100mL pH=7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液中，混匀，采用HTY-306A过滤系统过滤，随后用pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗3次，（100mL/膜），在最后一次冲洗液中加入1mL含菌量不大于100cfu的金黄色葡萄球菌悬液，滤干后将膜取出贴于TSA平板后，按药典要求（中国药典2020版四部通则1105）置30-35℃培养2-3天，点计滤膜上的菌落数。枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、黑曲霉和白色念珠菌依照此法操作。计算5株试验菌的回收率，回收率（%）=（试验组菌落数-供试品对照组菌落数）÷菌液对照组菌落数×100%，最后对试验菌的回收率进行计算。

TYMC方法适用性试验

取供试品片剂/颗粒剂1:10供试液或者胶囊剂1:20供试液，分装该供试液，取5支无菌的试管，每支分装9.9mL，分别加入适宜浓度的白色念珠菌菌悬液，控制最终每支试管中每mL菌含量低于100cfu，将此作为试验组。将上述混合液2mL分别无菌吸取到直径为 90mm 的无菌平皿中（1mL/皿），然后注入SDA培养基，按药典规定（中国药典2020版四部通则1105），置于20-25℃培养3天，点计平板上的菌落数。黑曲霉依照此法操作，最后对试验菌的回收率进行计算。

大肠埃希菌方法适用性试验

取供试品片剂/颗粒剂1:10供试液10mL，或者胶囊剂1:20供试液20mL，直接接种至200 mL含4%吐温80和80万单位或120万单位头孢菌素酶的TSB中，同时接种1ml大肠埃希菌菌悬液（菌含量不超过100 cfu），混合均匀，按药典规定（中国药典2020版四部通则1106）培养观察。

沙门菌方法适用性试验

取供试品胶囊剂5g，加入含4%吐温80和500万单位头孢菌素酶的TSB中，同法制备两份，同时接种1 ml沙门菌菌悬液（菌含量不超过100 cfu），混合均匀，按药典规定（中国药典2020版四部通则1106）培养观察。

结果判定：1g供试品中，需氧菌总数不得过10³ cfu，霉菌和酵母菌数不得过10² cfu，不得检出大肠埃希菌；每10g供试品不得检出沙门菌（胶囊制剂）。