有关物质（芦丁） 照高效液相色谱法（中国药典2020年版四部通则0512）测定。

溶剂 流动相A-流动相B（80：20）。

供试品溶液 取含量测定项下细粉适量（约相当于芦丁20mg），精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇10ml，超声使芦丁溶解，用溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液。

对照品溶液 取芦丁对照品适量，精密称定，加甲醇适量使溶解，并用溶剂定量稀释制成每1ml中约含芦丁4μg的溶液。

灵敏度溶液 精密量取对照品溶液适量，用溶剂定量稀释制成每1ml中约含芦丁0.2μg的溶液。

异槲皮苷对照品贮备液 取异槲皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇适量使溶解，用溶剂定量稀释制成每1ml中约含异槲皮苷40μg的溶液。

系统适用性溶液 取含量测定项下细粉适量（约相当于芦丁20mg），精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇10ml，超声使芦丁溶解，加入异槲皮苷对照品贮备液5.0ml，用溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液。

色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸盐缓冲液（0.1mol/L磷酸二氢钠溶液，用磷酸调节pH值至4.4）为流动相A，以乙腈为流动相B，按下表进行线性梯度洗脱；流速为每分钟1.0ml；检测波长为254nm；进样体积20μl。

系统适用性要求 系统适用性溶液色谱图中，芦丁峰与异槲皮苷峰之间的分离度应不小于2.0；灵敏度溶液色谱图中芦丁峰的信噪比应不小于10。

测定法 精密量取对照品溶液与供试品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。

限度 供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，除维生素C及其之前的色谱峰外，按加校正因子的主成分对照品法计算，槲皮素不得过4.0%，异槲皮苷不得过2.0%，山奈素-3-O-芸香苷不得过3.0%，异鼠李素-3-O-芸香苷不得过2.0%，其他单个杂质不得过1.0%，杂质总量不得过7.0%。供试品溶液色谱图中小于灵敏度溶液主峰面积的峰忽略不计（0.05%）。

附1：有关物质供试品溶液典型HPLC图

附2：已知杂质信息

异槲皮苷

C₂₁H₂₀O₁₂  464.38

2-（3,4-二羟基苯基）-3-（β-D-呋喃葡萄糖基氧基）-5,7-二羟基-4H-1-苯并吡喃-4-酮

槲皮素

C₁₅H₁₀O₇  302.24

2-(3,4-二羟基苯基)-3,5,7-三羟基-4H-色烯-4-酮

山奈素-3-O-芸香苷

C₂₇H₃₀O₁₅  594.52

3-[[6-O-（6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基）-β-D-吡喃葡萄糖基]氧基]-5,7-二羟基-2-（4-羟基苯基）-4H-1-苯并吡喃-4-酮

异鼠李素-3-O-芸香苷

C₂₈H₃₂O₁₆  624.17

3-[[6-O-（6-脱氧-α-L-吡喃甘露糖基）-β-D-吡喃葡萄糖基]氧基]-5,7-二羟基-2-（3-甲氧基-4-羟基苯基）-4H-1-苯并吡喃-4-酮