照高效液相色谱法（中国药典2020年版四部0512）测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（Durashell C18，4.6×250mm，5μm或效能相当色谱柱）；以甲醇为流动相A，0.1%甲酸为流动相B，按表1中的规定进行梯度洗脱；流速为1mL/min；柱温40℃；检测波长为280nm。理论板数按6-姜辣素峰计算应不低于5000。
表1流动相梯度
t（min） | A（％） | B（％） |
0～10 | 35→60 | 65→40 |
10～12 | 60→70 | 40→30 |
12～28 | 70 | 30 |
28～30 | 70→80 | 30→20 |
30～38 | 80→100 | 20→0 |
38～45 | 100 | 0 |
对照品溶液的制备 取芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml分别为20μg、5μg、10μg、60μg、15μg的混合对照品溶液。
供试品溶液的制备 精密量取本品3ml，蒸干，残渣加8%盐酸20ml、三氯甲烷10ml，加热回流1小时，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗涤容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷振摇提取3次，每次10ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各2μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每1ml含大黄游离蒽醌以芦荟大黄素（C15H10O5）、大黄酸（C15H8O6）、大黄素（C15H10O5）、大黄酚（C15H10O4）和大黄素甲醚（C16H12O5）的总量计，不得少于0.15mg。
