【检查】罗丹明B 照质谱法（《中国药典》2020年版通则0431）测定
色谱、质谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，0.1%甲酸为流动相B，按表1中的规定进行梯度洗脱，流速为0.4ml/min，柱温40℃；采用三重四级杆质谱检测器，电喷雾离子源（ESI）正离子模式下进行检测。对照试剂的监测离子对、碰撞能量（CE）参考值见表2。按上述离子对测定的色谱峰的信噪比均应大于3:1。
表1流动相梯度
时间（分钟） | 流动相A（％） | 流动相B（％） |
0～6 | 35→52 | 65→48 |
6～10 | 52→95 | 48→5 |
10～14 | 95 | 5 |
14～15 | 95→35 | 5→65 |
15～25 | 35 | 65 |
表2对照品（对照试剂）的监测离子对、碰撞能量（CE）参考值
中文名 | 英文名 | 母离子 | 子离子 | CE |
罗丹明B | Rhodamine B | 443.2 443.2 | 399.1 355.1 | 44 55 |
对照品溶液的制备 取罗丹明B对照品适量，精密称定，加10%乙醇溶液制成每1ml含1ng的溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液的制备 取本品，摇匀，滤过（0.2μm微孔滤膜），取续滤液，即得。
测定法 分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液各1µl，注入高效液相色谱-质谱联用仪，测定，即得。
结果判断 供试品色谱中，如检出与罗丹明B对照品保留时间相同的色谱峰，并且所选择的两对子离子的质荷比一致，供试品溶液的定性离子相对丰度比与浓度相当对照品溶液的定性离子相对丰度比进行比较时，相对偏差不超过下列规定的范围，则可判定样品中存在该组分：相对比例〉50%，允许士20%偏差；相对比例20%～50%，允许士25%偏差；相对比例10%～20%，允许士30%偏差；相对比例≤10%，允许±50%偏差。
