有关物质 照高效液相色谱法(中国药典2020版四部通则0512)测定
供试品溶液 取本品适量,用流动相A稀释制成每1ml中约含顺阿曲库铵1mg的溶液。
对照品溶液 取苯磺顺阿曲库铵对照品适量,用流动相A溶解并稀释制成每1ml约含顺阿曲库铵0.02mg的溶液。
系统适用性溶液 取苯磺酸阿曲库铵对照品适量,加流动相A溶解并稀释制成每1ml中含苯磺酸阿曲库铵1mg的溶液。
色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Waters XBridge C18 ,250mm×4.6mm,5.0μm或效能相当的色谱柱);以1.02%磷酸二氢钾缓冲溶液(用磷酸调节pH至3.1)-甲醇-乙腈(75:5:20)为流动相A,以1.02%磷酸二氢钾缓冲溶液(用磷酸调节pH至3.1)-甲醇-乙腈(50:30:20)为流动相B,按下表进行梯度洗脱;检测波长为280nm;柱温为30℃;进样器温度为4℃;进样体积20μl,调节流速使顺阿曲库铵峰保留时间约为30分钟。
时间(分钟) | 流速(ml/min) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0 | 0.9 | 80 | 20 |
5 | 0.9 | 80 | 20 |
15 | 0.9 | 55 | 45 |
45 | 0.9 | 55 | 45 |
47 | 0.9 | 100 | 0 |
50 | 0.9 | 100 | 0 |
52 | 0.9 | 20 | 80 |
60 | 0.9 | 20 | 80 |
系统适用性要求 系统适用性色谱图中,反-反异构体(杂质G,相对保留时间约为0.83)、顺-反异构体(杂质H,相对保留时间约为0.91)和顺阿曲库铵依次出峰,各相邻色谱峰之间的分离度应符合要求。
测定法 精密量取供试品溶液与对照品溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。
限度 供试品溶液色谱图中如有杂质峰,按外标法以顺阿曲库铵峰面积计算,杂质A(相对保留时间约为0.22)不得过3.0%,杂质C(相对保留时间约为0.28)不得过3.0%,杂质F(相对保留时间约为0.45)不得过3.0%,杂质O(相对保留时间约为1.58)不得过2.5%,杂质G(相对保留时间约为0.83)不得过0.5%,杂质H(相对保留时间约为0.91)不得过0.5%,其他单个杂质不得过0.2%,其他杂质总量不得过3.0%,各杂质峰面积之和不得过8.0%。