地塞米松磷酸钠注射液中有关物质1检查项、有关物质2检查项测定方法

发布时间：2024-06-18

【检查】有关物质1 照高效液相色谱法（通则0512）测定。

供试品溶液取本品适量，用流动相A定量稀释制成每1ml溶液中含地塞米松磷酸钠1mg的溶液。

对照溶液精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，用流动相A稀释至刻度，摇匀。

灵敏度溶液精密量取对照溶1ml，置10ml量瓶中，用流动相A稀释至刻度，摇匀。

杂质定位溶液取地塞米松磷酸钠峰定位对照品（含杂质A、C、D、E、F、G）适量，加流动相A溶解并稀释制成每1ml含1mg的溶液。

系统适用性溶液取杂质B和地塞米松磷酸钠对照品适量，加流动相A溶解并稀释制成浓度分别为0.02mg/ml的溶液。

色谱条件用辛基硅烷键合硅胶为填充剂（Kromasil C₈，4.6×125 mm，5μm）或分离效能相当的色谱柱，以[7.0g/L乙酸铵溶液-水（30:35），乙酸调pH值至3.8]-甲醇（65:35）为流动相A，以[7.0g/L乙酸铵溶液-乙酸调pH值至4.0]-甲醇（30:70）为流动相B，按下表进行梯度洗脱；柱温：30 ℃；检测波长：254nm；流速为每分钟1.0 ml；进样体积：20μl。

流动相梯度洗脱表

时间（分钟）	流动相A	流动相B
0	90	10
3.5	90	10
23.5	60	40
34.5	5	95
50	5	95
55	90	10
65	90	10

系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中，杂质B峰与地塞米松磷酸钠峰的分离度应不小于2.0。灵敏度溶液色谱图中，主成分峰高的信噪比应不小于20。

测定法精密量取系统适用性溶液、峰定位溶液、供试品溶液和对照溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。

限度供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，按乘以校正因子的主成分自身对照法计算杂质含量，均应符合表中相应规定。与地塞米松磷酸钠峰相对保留时间为0.25之前的峰忽略不计，小于0.05%的杂质峰忽略不计。

化合物名称	相对保留时间	校正因子	限度%
杂质A	约1.37	0.75	0.5
杂质B	约0.95	1.0	0.5
杂质C	约0.5	1.0	0.5
杂质D	约0.6	1.0	0.5
杂质E	约0.8	1.0	0.5
杂质F	约0.92	1.0	0.5
杂质G	约1.41	1.0	0.5
其他单个杂质	/	/	0.2
杂质总量(包含杂质Ⅰ)	/	/	2.0

有关物质2 照高效液相色谱法（通则0512）测定。

供试品溶液取本品适量，加流动相定量稀释制成每1ml中约含地塞米松磷酸钠0.5mg的溶液。

对照品溶液取杂质Ⅰ对照品约10mg，用流动相溶解并定量稀释制成每1ml溶液中含杂质Ⅰ5μg的溶液。

系统适用性溶液取地塞米松磷酸钠对照品，加流动相溶解并稀释制成每1ml溶液中约含1mg的溶液，另取地塞米松对照品，加甲醇溶解并稀释制成每1ml溶液中约含1mg的溶液，另取杂质Ⅰ对照品，加流动相溶解并稀释制成每1ml溶液中约含1mg的溶液。分别精密量取上述溶液，加流动相稀释制成每1ml溶液中各约含5μg的溶液。

色谱条件用十八烷基键合硅胶为填充剂（Thermo BDS HYPERSIL C18，4.6mm× 250mm，5μm或分离效能相当的色谱柱）；以三乙胺溶液（取三乙胺7.5ml，加水稀释至1000ml，用磷酸调节pH值至3.0±0.05）-甲醇-乙腈（58:39:3）为流动相；柱温为40℃；检测波长：242nm；进样体积：20μl。

系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中，理论板数按地塞米松磷酸酯峰计算不低于7000，杂质Ⅰ峰、地塞米松峰与地塞米松磷酸钠峰的分离度均应大于4.4。

测定法精密量取系统适用性溶液、供试品溶液和对照品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。

限度供试品溶液的色谱图中如有杂质Ⅰ峰，按外标法计算杂质Ⅰ含量，不得过标示量的1.0%。小于0.05%的杂质峰忽略不计。

附件

杂质A