【处方】拳参140g 穿心莲100g 苦参170g
【鉴别】拳参 照高效液相色谱-质谱法(中国药典2020年版通则0512和通则0431)测定。
色谱、质谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(色谱柱WatersACQUITYUPLC HSS T3,内径2.1mm,长150mm,粒径1.8µm);以0.1%甲酸溶液为流动相A,以乙腈为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱,流速为每分钟0.2ml。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~5 | 90→90 | 10→10 |
5~20 | 90→82 | 10→18 |
20~24 | 82→82 | 18→18 |
24~34 | 82→60 | 18→40 |
采用三重四级杆质谱检测器,电喷雾离子化(ESI)负离子模式下选择反应监测(SRM),监测离子对见下表:
测定成分 | 定量离子对m/z | 定性离子对m/z |
Q376 | 375.1→271.1 | 375.1→137.0 |
槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷 | 477.1→301.0 | 477.1→255.1 |
对照药材溶液的制备 取拳参对照药材粗粉约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入40%甲醇50ml,超声处理(功率500W,频率40kHz)40分钟,放冷,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
对照品溶液的制备 取槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷对照品适量,精密称定,加40%甲醇制成每1ml含10µg的溶液,即得。
供试品溶液的制备 取本品4片,或除去包衣,研细,取1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入40%甲醇25ml,超声处理(功率500W,频率40kHz)40分钟,放冷,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各2μl,注入液相色谱-质谱联用仪,测定,即得。
供试品色谱中应呈现与对照药材色谱和对照品色谱保留时间相对应的色谱峰,对色谱峰进行积分,按下列公式计算,计算值应不得小于10,大于等于10即视为检出拳参。
【检查】珠芽蓼 照高效液相色谱-质谱法(中国药典2020年版通则0512和通则0431)测定。
色谱、质谱条件与系统适用性试验同【鉴别】项。监测离子对见下表:
测定成分 | 定量离子对m/z | 定性离子对m/z |
Z376 | 375.1→271.1 | 375.1→137.0 |
槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷 | 477.1→301.0 | 477.1→255.1 |
对照药材溶液的制备取珠芽蓼对照药材粗粉约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入40%甲醇50ml,超声处理(功率500W,频率40kHz)40分钟,放冷,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
对照品溶液的制备 取槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷对照品适量,精密称定,加40%甲醇制成每1ml含10µg的溶液,即得。
供试品溶液的制备 取本品4片,或除去包衣,研细,取1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入40%甲醇25ml,超声处理(功率500W,频率40kHz)40分钟,放冷,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各2μl,注入液相色谱-质谱联用仪,测定,即得。
对供试品中获得的色谱峰进行积分,按公式计算,计算值应不得大于等于1,大于等于1即视为检出珠芽蓼。
结果判定:鉴别项计算值大于等于10且检查项计算值小于1,即为拳参。
备注:建议使用中国食品药品检定研究院最新批次的拳参对照药材。