【检查】照高效液相色谱-质谱法(中国药典2020年版通则0512和0431)测定。
色谱、质谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(色谱柱内径2.1mm);以甲醇为流动相A, 以0.1%甲酸溶液为流动相B, 按下表中的规定进行梯度洗脱;流速为0.4ml/min;采用质谱检测器,电喷雾负离子模式(ESI-),进行多反应监测(MRM),选择m/z 845.5→653.4和m/z 845.5→491.4作为检测离子对。取对照品溶液,进样1μl,按上述离子对测定的MRM色谱峰的信噪比均应大于10:1。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~10 | 45→80 | 55→20 |
10~10.5 | 80→95 | 20→5 |
10.5~13 | 95 | 5 |
对照品溶液的制备取拟人参皂苷F11对照品适量,精密称定,加75%甲醇制成每1ml含0.5μg的溶液,即得。
供试品溶液的制备取装量差异项下的本品胶囊内容物适量,混匀,取规格(1)约0.10g,规格(2)约0.12g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入75%甲醇25ml,称定重量,超声处理(功率500W,频率37kHz)30分钟,取出,放冷,再称定重量,用75%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1μl,注入高效液相色谱-质谱联用仪,测定,记录色谱图。
结果判定供试品提取的离子流色谱中,应不得检出与对照品溶液色谱相应的色谱峰。若供试品色谱中出现保留时间与对照品溶液色谱相应的色谱峰,且供试品色谱中m/z 845.5→653.4的色谱峰面积值大于对照品溶液中相应的峰面积值,则视为阳性检出。