【检查】山麦冬 照高效液相色谱-质谱法(《中国药典》2020年版通则0512和通则0431)测定。
色谱、质谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(内径2.1mm,粒径1.8μm);以乙腈为流动相A,以0.1%乙酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱,流速为每分钟0.3ml;采用串联四级杆质谱检测器,电喷雾离子化(ESI)正离子模式,多反应离子监测(MRM),选择m/z723.50→251.20和m/z723.50→269.20(山麦冬皂苷B)、m/z871.75→431.40和m/z871.75→413.35(短葶山麦冬皂苷C)作为检测离子对进行检测。按上述离子对测定的MRM色谱峰信噪比均应大于3:1。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~3 | 30→60 | 70→40 |
3~7 | 60→90 | 40→10 |
7~8 | 90 | 10 |
对照品溶液的制备 取山麦冬皂苷B和短葶山麦冬皂苷C对照品适量,精密称定,加50%甲醇制成每1ml含0.1μg的对照品溶液,即得。
参比溶液的制备 取山麦冬皂苷B对照溶液用50%甲醇稀释制成1ml含20ng的溶液,即得;取短葶山麦冬皂苷C对照溶液,即得。
供试品溶液的制备 精密量取取本品1ml,置10ml量瓶中,加50% 甲醇适量,超声处理30分钟,放冷,用50%甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2μl,注入液相色谱-质谱联用仪,测定,即得。
结果判断 供试品色谱中在与山麦冬皂苷B和短葶山麦冬皂苷C对照品色谱峰保留时间相应的位置不得出现相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰,且所选的两个离子对均出现,而且所选的检测离子对峰面积比与对照品的检测离子峰面积比一致(相对比例>50%,允许±25%偏差:相对比例>10%~20%,允许±30%偏差;相对比例≤10%,允许±50%偏差),且该色谱峰的峰面积大于参比溶液的峰面积值,则视为阳性检出。