参麦颗粒中伪原薯蓣皂苷检查方法

发布时间:2022-12-28

【检查】伪原薯蓣皂苷照高效液相色谱法(《中国药典》2020版通则0512)和质谱法(《中国药典》2020版通则0413)测定。

色谱、质谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(色谱柱内径2.1mm);以乙腈为流动相A,0.1%甲酸水溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;流速为0.35ml/min;柱温为40℃;采用质谱检测器,电喷雾负离子模式(ESI-),进行多反应监测(MRM),选择质荷比m/z1029.7→883.2和m/z1029.7→737.5作为检测离子对。取对照品溶液,进样1µl,按上述离子对测定的MRM色谱峰的信噪比均应大于10:1。

时间(分钟)

流动相A(%)

流动相B(%)

0~5

20→50

80→50

5~10

50→80

50→20

对照品溶液的制备取伪原薯蓣皂苷对照品,精密称定,加甲醇制成每1ml含伪原薯蓣皂苷为50ng的溶液,即得。

供试品溶液的制备取本品细粉约2.0g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入水20ml,密塞,超声处理(功率700 W,频率80 kHz)30分钟,取出,放冷,滤过,取续滤液10ml,取续滤液10ml,加在C18固相萃取小柱(500mg,容量为6ml,预先用甲醇6ml、水6ml洗脱)上,用水15ml洗脱,放置5min,继用甲醇15ml洗脱,收集洗脱液,收集洗脱液,置蒸发皿中蒸干,残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml溶液,置100ml量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,用0.22µm滤膜滤过,取续滤液,即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1µl,注入液相色谱-质谱联用仪,测定,记录色谱图。

判定原则(1)供试品的提取离子流色谱中,未同时出现与对照品溶液色谱相对应的色谱峰,视为未检出;(2)供试品的提取离子流色谱中,同时出现与对照品溶液色谱相对应的色谱峰,且供试品色谱中m/z1029.7→883.2的色谱峰面积值不大于对照品溶液中相应的峰面积值者,视为未检出;(3)供试品的提取离子流色谱中,同时出现与对照品溶液色谱相对应的色谱峰,且供试品色谱中m/z1029.7→883.2的色谱峰面积值大于对照品溶液中相应的峰面积值者,视为检出。

结果判定供试品的提取离子流色谱中,应不得检出与对照品溶液色谱相应的色谱峰。