【检查】土大黄苷 （1）取本品4g，研细，加甲醇20ml，加热回流30分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，作为供试品溶液。另取土大黄苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2020年版四部通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸-水（10︰3.5︰0.2︰0.3）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应不得出现相同颜色的荧光斑点，若出现相同颜色的荧光斑点或不易判断，则用下列高效液相色谱法验证。

（2）照高效液相色谱法（中国药典2020年版四部通则0512）测定

色谱条件及系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（20﹕80）为流动相；采用二极管阵列检测器，检测波长328nm。理论板数按土大黄苷峰计算应不低于2500。

对照品溶液的制备 取土大黄苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备 取本品适量，研细，称取约0.5g（约相当于大黄0.1g），置锥形瓶中，加入甲醇20.0ml，超声处理（功率100w，频率53kHZ）40分钟，滤过，取续滤液，即得。

测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪测定，即得。

结果判定 供试品色谱中，应不得呈现与土大黄苷对照品色谱保留时间相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，其在280～400nm波长范围的紫外-可见吸收光谱应与对照品不同。

必要时可采用高效液相色谱-质谱联用法验证。推荐使用多反应监测（MRM）模式进行验证。

照高效液相色谱-质谱法（中国药典2020年版四部通则0512和 0431)测定

色谱条件  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（25﹕75）为流动相，流速0.2ml/min，柱温为30℃。

质谱条件 电喷雾电离源（ESI），负离子模式，多反应监测（MRM），选择 419.26→257.28、m/z 419.26→241.26作为检测离子对。

对照品溶液的制备  取土大黄苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.5μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备  取本品适量，研细，称取约0.5g（约相当于大黄0.1g），置锥形瓶中，加入甲醇20.0ml，超声处理（功率100w，频率53kHZ）40分钟，滤过，取续滤液，即得。

测定法  精密吸取对照品溶液和供试品各2μl，注入液质联用仪，记录MRM离子流图谱。

结果判定  供试品离子流图谱中，应不得出现与土大黄苷对照品保留时间相同的离子流峰。