栀子金花丸中酚酸类的HPLC含量测定方法

发布时间:2022-12-28

【含量测定】 照高效液相色谱法(《中国药典》2020年版四部通则0512)测定。

色谱条件以系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,0.1%磷酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;流速0.7ml/min;柱温不高于25;检测波长:327nm。理论塔板数按绿原酸峰计应不低于5000。

时间(分钟)

流动相A(%)

流动相B(%)

0~8

14→19

86→81

8~14

19

81

14~34

19→31

81→69

34~35

31→90

69→10

35~40

90

10

对照品溶液的制备   取绿原酸、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸对照品适量,精密称定,加75%甲醇制成每1ml含绿原酸70μg、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸40μg、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸10μg的溶液,作为混合对照品溶液。

供试品溶液的制备 取重量差异项下的本品,研细,混匀,取约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入75%甲醇25ml,称定重量,超声处理30分钟,放冷,再称定重量,用75%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μ1,注入液相色谱仪,测定,即得。

拟定限度:本品每1g含酚酸类以绿原酸(C16H18O9)、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸(C25H24O12)和4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸(C25H24O12)的总量计,不得少于2.0mg/g。