【含量测定】 照高效液相色谱法(《中国药典》2020年版四部通则0512)测定。
色谱条件以系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,0.1%磷酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;流速0.7ml/min;柱温不高于25℃;检测波长:327nm。理论塔板数按绿原酸峰计应不低于5000。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~8 | 14→19 | 86→81 |
8~14 | 19 | 81 |
14~34 | 19→31 | 81→69 |
34~35 | 31→90 | 69→10 |
35~40 | 90 | 10 |
对照品溶液的制备 取绿原酸、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸对照品适量,精密称定,加75%甲醇制成每1ml含绿原酸70μg、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸40μg、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸10μg的溶液,作为混合对照品溶液。
供试品溶液的制备 取重量差异项下的本品,研细,混匀,取约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入75%甲醇25ml,称定重量,超声处理30分钟,放冷,再称定重量,用75%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μ1,注入液相色谱仪,测定,即得。
拟定限度:本品每1g含酚酸类以绿原酸(C16H18O9)、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸(C25H24O12)和4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸(C25H24O12)的总量计,不得少于2.0mg/g。