【鉴别】取本品水蜜丸适量,研细,取约1.0g;或取小蜜丸或大蜜丸适量,剪碎,取约1.5g,精密称定,置圆底烧瓶中,精密加入80%甲醇25ml,密塞,称定重量,置80℃水浴中加热回流75分钟,取出,放冷,再称定重量,用80%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,作为供试品溶液。取酸枣仁皂苷A对照品适量,精密称定,加80%甲醇制成每1ml含0.1μg的溶液,作为对照品溶液。照高效液相色谱法-质谱法(中国药典2022年版通则0512和通则0431)试验,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(色谱柱内径为2.1mm);以乙腈为流动相A,以0.1%甲酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;流速为每分钟0.35ml;柱温为40℃。采用质谱检测器,电喷雾正离子模式(ESI+),进行多反应监测(MRM),选择质荷比(m/z)1207.6→473.4和(m/z)1207.6→455.2作为检测离子对。取酸枣仁皂苷A对照品溶液,进样5µl,按上述离子对测定的MRM色谱峰的信噪比均应大于3:1。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~2 | 20→50 | 80→50 |
2~5 | 50→80 | 50→20 |
吸取供试品溶液5µl,注入高效液相色谱-质谱联用仪,测定。以质荷比(m/z)1207.6→473.4和(m/z)1207.6→455.2离子对提取的供试品离子流色谱中,应同时呈现与对照品色谱保留时间一致的色谱峰。