【检查】山麦冬皂苷B、短葶山麦冬皂苷C 照高效液相色谱法（中国药典2020年版四部通则0512）和质谱法（中国药典2020年版四部通则0431）测定。

色谱、质谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1%甲酸溶液（50:50）为流动相，流速为每分钟0.3ml；采用质谱检测器，多反应检测（MRM）, 山麦冬皂苷B为电喷雾正离子（ESI⁺）模式，选择质荷比（m/z）723.58→269.29和723.58→251.28作为检测离子对，短葶山麦冬皂苷C为电喷雾负离子（ESI^-）模式，选择质荷比（m/z）869.56→737.57和869.56→119.17作为检测离子对。取对照品溶液，进样5µl，按上述离子对测定的MRM色谱峰的信噪比均应大于10：1。

对照品溶液的制备  取山麦冬皂苷B和短葶山麦冬皂苷C对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1ml含山麦冬皂苷B 0.5μg和短葶山麦冬皂苷C 1.0μg的混合溶液，即得。

供试品溶液的制备 取咽炎片10片，除去糖衣或薄膜衣，研细，置具塞锥形瓶中，加入热水25ml，超声处理60分钟，取出，放冷，离心（每分钟5000转）3分钟，取上清液，加水饱和正丁醇25ml振摇提取。分取正丁醇层，蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5µl，注入高效液相色谱-质谱联用仪，测定，即得。

（1）供试品的提取离子流色谱中，未出现与山麦冬皂苷B或短葶山麦冬皂苷C对照溶液色谱相应的色谱峰，视为未检出；（2）供试品的提取离子流色谱中，出现与山麦冬皂苷B或短葶山麦冬皂苷C对照溶液色谱相应的色谱峰，且供试品色谱中m/z723.58→251.28和m/z869.56→737.57的色谱峰峰面积值不大于山麦冬皂苷B或短葶山麦冬皂苷C对照溶液中相应的峰面积值者，视为未检出；（3）供试品的提取离子流色谱中，出现与山麦冬皂苷B或短葶山麦冬皂苷C对照溶液色谱相应的色谱峰，且供试品色谱中m/z723.58→251.28和m/z869.56 →737.57的色谱峰峰面积值大于山麦冬皂苷B或短葶山麦冬皂苷C对照溶液中相应的峰面积值者，视为检出；

注：结果判定中，提取山麦冬皂苷B和短葶山麦冬皂苷C离子峰，不限于 [M-H]^-，也可提取[M+HCOO]^-峰或其它相应的离子峰，结果均不得显示相应色谱峰。