有关物质 照高效液相色谱法(通则0512)测定。
溶剂 甲醇-水(20:80)
供试品溶液 取本品内容物适量,研细,精密称取细粉适量加溶剂超声使左羟丙哌嗪溶解并定量稀释制成每1ml中约含左羟丙哌嗪0.5mg的溶液,滤过,取续滤液。
对照品溶液 取苯基哌嗪对照品适量,精密称定,加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含50μg的溶液。精密量取1ml,置100ml量瓶中,用溶剂稀释至刻度,摇匀。
系统适用性溶液 取苯基哌嗪和左羟丙哌嗪各适量,加甲醇适量使溶解后,用溶剂稀释制成每1ml中分别约含10μg与100μg的溶液。
色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以磷酸盐缓冲液(称取磷酸二氢钾0.34g,加水1000ml溶解,用磷酸调pH值至2.5)为流动相A,甲醇为流动相B,按下表梯度洗脱;柱温为40℃,流速为0.7ml/min,检测波长为241nm。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0 | 80 | 20 |
10 | 80 | 20 |
35 | 40 | 60 |
36 | 80 | 20 |
50 | 80 | 20 |
系统适用性要求 系统适用性溶液色谱图中,理论板数按左羟丙哌嗪峰计算不低于2000,左羟丙哌嗪与苯基哌嗪的分离度应符合规定。
测定法 精密量取供试品溶液与对照品溶液各10µl,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。
限度 供试品溶液中如有与苯基哌嗪保留时间一致的色谱峰,按外标法以峰面积计算,不得过标示量的0.2%;其他单个杂质,以对照品溶液主峰面积为对照,按外标法以峰面积计算,不得过标示量的0.2%,各杂质总量不得过标示量的0.5%。