照高效液相色谱法（通则0512）测定。避光操作。

供试品溶液 取本品适量，滤过，取续滤液。

对照品溶液 取维生素B₁₂对照品适量，精密称定，加水溶解并稀释制成每1ml中约含维生素B₁₂ 3μg的溶液。

色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-磷酸盐缓冲液（称取磷酸二氢钾6.8g，加水1000ml使其溶解，用磷酸调节pH值至3.0±0.05）（9:91）为流动相；流速为1.0ml/min；柱温为30℃；检测波长为361nm；进样体积20μl。

系统适用性要求 系统适用性溶液色谱图中，理论塔板数按维生素B₁₂峰计算不低于2000，供试品溶液中维生素B₁₂峰与相邻峰分离度应符合要求。

测定法 精密量取供试品溶液与对照品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算。