一、高效液相色谱法

照高效液相色谱法（《中国药典》2020年版四部通则0512）测定。

稀释剂  磷酸盐缓冲液（pH3.2）（取二水合磷酸二氢钠2.77g，加水900ml溶解，用磷酸调pH至3.2±0.05，加水至1000ml）-乙腈（66:34）

供试品溶液  取本品5瓶，上下轻轻振摇，将内容物倒入烧杯中，混匀，用内容量移液管精密量取5ml，置50ml棕色量瓶中，加稀释剂适量，超声溶解10分钟，放冷，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，以每分钟13000转的速度离心20分钟，取上清液滤过，取续滤液。

对照品溶液  精密称取没食子酸丙酯对照品适量，用稀释剂溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.25、1、2.5、5、12μg的系列溶液。

系统适用性溶液  取没食子酸丙酯与山梨酸钾对照品各适量，用稀释剂溶解并制成每1ml中约含没食子酸丙酯2.5μg与山梨酸钾0.12mg的溶液。

灵敏度溶液  精密量取对照品溶液（0.25μg/ml）3ml，置5ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀。

色谱条件  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（150mm×4.6mm，3μm或其他性能相当的色谱柱）；以磷酸盐缓冲液（pH3.2）-乙腈-乙醇（66:34:2）作为流动相；柱温为50℃；检测波长为240nm；进样体积为20μl。

系统适用性试验  在系统适用性溶液色谱图中，没食子酸丙酯峰与山梨酸钾峰之间的分离度应不小于2.0；对照品溶液（0.25μg/ml）主峰信噪比应不小于10，灵敏度溶液主峰信噪比应不小于3。

测定法  精密量取供试品溶液与对照品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。

结果判断  供试品溶液色谱图中不得检出与对照品溶液主峰保留时间一致的色谱峰（信噪比小于3的色谱峰不计）。如检出与对照品溶液中没食子酸丙酯峰保留时间一致的色谱峰，照“二、液-质联用方法（HPLC-MS/MS）”项下验证。

计算  如经验证为没食子酸丙酯峰，可按外标法计算供试品中没食子酸丙酯的含量。

二、液-质联用方法（HPLC-MS/MS）

照高效液相色谱法（《中国药典》2020年版四部通则0512）及质谱法（《中国药典》2020年版四部通则0431）测定。

稀释剂  水-乙腈（66：34）

供试品溶液  取“一”项下混匀后的内容物，用内容量移液管精密量取5ml，置50ml棕色量瓶中，加稀释剂适量，超声溶解10分钟，放冷，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，以每分钟13000转的速度离心20分钟，取上清液过滤，精密量取续滤液1ml，至10ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀。

对照品溶液  取没食子酸丙酯对照品适量，用稀释剂溶解并制成每1ml中约含0.25μg的溶液，摇匀。

色谱条件  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（ACQUITY UPLC HSS C18，100mm×2.1mm，1.8μm或其他性能相当的色谱柱）；以醋酸盐缓冲液（pH4.0）（取醋酸铵0.3g，加水900ml溶解，用醋酸调pH至4.0±0.05，加水至1000ml）作为流动相A，以乙腈作为流动相B，按下表进行洗脱梯度；柱温为50℃；流速为每分钟0.3ml；进样体积为2μl。 没食子酸丙酯峰的保留时间约为4.8分钟。

   质谱条件  以三重四级杆质谱仪检测，使用电喷雾负离子扫描模式（ESI^-），质谱采集时间为4～5.4分钟（根据实际出峰情况适当调整）。离子源参考参数见下表。

监测模式1为产物扫描（Product scan），母离子质荷比（m/z）为211，子离子质荷比（m/z）扫描范围为50～250，碰撞电压为15eV；监测模式2为多反应监测（MRM），监测离子对参见下表。应针对性优化最佳离子源参数及碰撞电压。

测定法  精密量取供试品溶液与对照品溶液，分别注入液相色谱仪，记录质谱图。

定性确证  供试品溶液监测模式1记录的质谱图中，如各离子碎片质荷比（m/z）与对照品各离子碎片质荷比（m/z）基本一致；且供试品溶液监测模式2记录的离子流色谱图中，如质荷比（m/z）211→169和211→124的离子对均出现，且与对照品相应离子对的相对离子丰度偏差未超出下表规定的范围，则可判断供试品中存在没食子酸丙酯。