【检查】5-[4’-[(5-(叠氮甲基)-2-丁基-4-氯-1H-咪唑-1-基)甲基]-[1,1’-联苯]2-基]-1H-四唑(LADX) 照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部通则0512)和质谱法(中国药典2020年版四部通则0431)测定。
对照品溶液制备 精密称取5-[4’-[(5-(叠氮甲基)-2-丁基-4-氯-1H-咪唑-1-基)甲基]-[1,1’-联苯]2-基]-1H-四唑对照品适量,加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含1、10、25、50、75、100、500、1000、2000、5000 ng的溶液。
供试品溶液制备 取本品适量,精密称定,加甲醇振摇使溶解并稀释制成每1ml中约含5mg氯沙坦钾的溶液,离心,取上清液滤过,取续滤液即得。
色谱条件 采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18,3.0 mm×100 mm,2.7 μm或效能相当色谱柱),以含0.1%甲酸的水溶液为流动相A,甲醇为流动相B,按下表进行梯度洗脱。流速为每分钟0.4 mL,柱温30 ℃,进样体积5 μL。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0 | 40 | 60 |
4 | 30 | 70 |
5 | 5 | 95 |
9 | 5 | 95 |
9.01 | 40 | 60 |
14 | 40 | 60 |
该叠氮类杂质的保留时间约为6.3分钟。
质谱条件 采用三重四级杆串联质谱仪检测,采用电喷雾离子源(ESI),使用正离子扫描模式,监测模式为多反应监测(MRM)。化合物的监测离子对、离子源参考参数参见下表。质谱采集时间为5~8.5分钟。
母离子 | 子离子 | 碎裂电压 | 碰撞电压 |
448.1 | 207.2 | 110 | 25 |
152.2 | 110 | 90 |
离子源参考参数
干燥气温度 | 干燥气流速 | 雾化气压力 | 鞘气温度 | 鞘气流速 | 电离电压 | 电晕针电流 |
300℃ | 5 L/min | 55 psi | 325 ℃ | 11 L/min | 3.5 kV | 6 μA |
测定法 分别取对照品溶液和供试品溶液,注入液相色谱仪,记录色谱图,量取峰面积,按标准曲线法计算。