【检查】 照高效液相色谱法（中国药典2020年版通则0512）测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，水为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；流速为每分钟0.8ml；检测波长为324nm；柱温为30℃；理论板数按3’(S)，4’(R)-双当归酰氧基-3’，4’-二氢花椒内酯峰计应不低于2000。
时间（分钟） | 流动相A（%） | 流动相B（%） |
0～30 | 58 | 42 |
30～35 | 58→80 | 42→20 |
35～45 | 80 | 20 |
对照品溶液的制备 取3’(S)，4’(R)－双当归酰氧基－3’，4’－二氢花椒内酯对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.3μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 取本品内容物2.5g，加乙醇50ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加氨试液10ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次（20ml，20ml，10ml），合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水20ml洗涤，取正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇4ml使溶解，加在中性氧化铝柱上（100～200目，3g，内径为1～1.5cm），用乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，并转移至10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
结果判断 供试品色谱图中，应不得出现与对照品色谱峰保留时间相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应的色谱峰的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同（对照品色谱峰在324nm波长处有最大吸收）；若吸收光谱相同，且该色谱峰的峰面积大于对照品溶液的峰面积值，视为阳性检出。
