【鉴别】 重楼 照高效液相色谱法（中国药典2015年版通则0512）和质谱法（中国药典2015年版通则0431）测定。
色谱、质谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（色谱柱粒径2.1mm）；以乙腈为流动相A，0.1%甲酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；流速为每分钟0.3ml。采用质谱检测器，电喷雾负离子模式（ESI+），进行多反应监测（MRM），选择m/z877.4→731.4和m/z877.4 →317.1作为重楼皂苷Ⅰ的检测离子对，选择m/z1027.3→891.4和m/z1027.3→641.2作为重楼皂苷Ⅱ的检测离子对，选择m/z1053.3 →907.4和m/z1053.3→641.2作为重楼皂苷Ⅶ的的检测离子对。按上述离子对检测的MRM色谱峰的信噪比均应大于3:1。
时间（分钟） | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0～5 | 20→30 | 80→70 |
5～15 | 30→41 | 70→59 |
15～20 | 41→45 | 59→55 |
20～25 | 45→50 | 55→50 |
对照品溶液的制备 分别取重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅶ对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml各含0.5μg的混合溶液，即得。
对照药材溶液的制备 取重楼对照药材0.5g，加70%甲醇25ml，超声30分钟，放冷，滤过，取续滤液0.1ml，置25ml量瓶中，加70%甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.22μm微孔滤膜滤过，即得。
供试品溶液的制备 取本品，混匀，精密量取1ml，置50ml量瓶中，加70%甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.22μm微孔滤膜滤过，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液、对照药材溶液与供试品溶液各5μl，注入高效液相色谱-质谱联用仪，测定，即得。
结果判定 以质荷比（m/z）877.4→731.4和质荷比（m/z）877.4 →317.1离子对提取的供试品离子流色谱图中，应同时检出与重楼皂苷Ⅰ对照品、对照药材色谱保留时间一致的色谱峰；以质荷比（m/z）1027.3→891.4和质荷比（m/z）1027.3→641.2离子对提取的供试品离子流色谱图中，应同时检出与重楼皂苷Ⅱ对照品、对照药材色谱保留时间一致的色谱峰；以质荷比（m/z）1053.3 →907.4和质荷比（m/z）1053.3→641.2离子对提取的供试品离子流色谱图中，应同时检出与重楼皂苷Ⅶ对照品、对照药材色谱保留时间一致的色谱峰。
【检查】 延龄草 照高效液相色谱法（中国药典2015年版通则0512）和质谱法（中国药典2015年版通则0431）测定。
色谱、质谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（色谱柱粒径2.1mm）；以乙腈为流动相A，0.1%甲酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；流速为每分钟0.3ml。采用质谱检测器，电喷雾负离子模式（ESI+），进行多反应监测（MRM），选择m/z 907.4→761.4、m/z 907.4→495.1和m/z 907.4→349.1作为延龄草皂苷B1的检测离子对。按延龄草皂苷B1的MRM（m/z 907.4→349.1）色谱峰的信噪比均应大于10:1。
时间（分钟） | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0～5 | 20→30 | 80→70 |
5～15 | 30→41 | 70→59 |
15～20 | 41→45 | 59→55 |
20～25 | 45→50 | 55→50 |
对照品溶液的制备 取延龄草皂苷B1对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.2μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 取本品，混匀，精密量取1ml，置50ml量瓶中，加70%甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.22μm微孔滤膜滤过，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入高效液相色谱-质谱联用仪，测定，即得。
结果判定 （1）供试品的提取离子流色谱中，未同时出现与对照品色谱相应的色谱峰，视为未检出；（2）供试品的提取离子流色谱中，出现与对照品溶液相应的色谱峰，且供试品色谱中m/z 907.4→761.4的色谱峰峰面积值不大于对照品中相应的色谱峰峰面积值者，视为未检出；（3）供试品的提取离子流色谱中，出现与对照品溶液相应的色谱峰，且供试品色谱中m/z 907.4→761.4的色谱峰峰面积值大于对照品中相应的色谱峰峰面积值者，视为检出。
