对羟基苯甲酸 如使用羟苯乙酯作为防腐剂,照高效液相色谱法(通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以带强酸性阴离子基团的烷基键合相为填充剂(SIELC Primesep A,4.6mm×250mm,5μm或效能相当的色谱柱);以水(含0.05%甲酸)为流动相A,以乙腈(含0.05%甲酸)为流动相B;流速为每分钟1.0ml;按下表进行梯度洗脱;柱温为30℃;检测波长为254nm。取供试品溶液5ml,加入1mol/L的氢氧化钠溶液5ml,静置30min,用5ml 1mol/L的盐酸溶液中和,以产生杂质A的溶液作为系统适用性溶液。取10µl注入液相色谱仪,记录色谱图。系统适用性溶液色谱图中,杂质A与利巴韦林峰分离度应符合要求。
流动相A(%) | 流动相B(%) | |
0 | 98 | 2 |
6 | 98 | 2 |
20 | 10 | 90 |
25 | 10 | 90 |
25.1 | 98 | 2 |
35 | 98 | 2 |
测定法 取本品,作为供试品溶液;另取对羟基苯甲酸对照品适量,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含对羟基苯甲酸3.5µg的溶液(临用新制),作为对照品溶液。精密量取供试品溶液与对照品溶液各10µl,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。按外标法以峰面积计算,含对羟基苯甲酸不得过羟苯乙酯标示量的0.5%。