本方法适用于复方罗布麻片Ⅰ中以大花罗布麻叶混充罗布麻叶的快速筛查和确证。该方法中，薄层色谱法用于快速筛查；高效液相色谱法用于对阳性样品的确认。必要时也可采用液相色谱-质谱的方法进行进一步确认。

【检查】白麻苷 （1）取本品20片，除去包衣，研细，加甲醇50ml，密塞，超声30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水5ml溶解（必要时可离心）后通过C₁₈（360mg，推荐使用Waters Plus C18或与其性能相当的固相萃取小柱，用甲醇10ml预洗，水10ml平衡）固相萃取小柱，以水20ml洗脱，弃去水液，再用30%甲醇20ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取白麻苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2015年版四部通则0502）试验，吸取上述两种溶液各1～2µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13:6:2）10℃以下放置的下层溶液9.5ml，加入0.5ml无水甲酸为展开剂（临用现配），展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铝乙醇溶液，在105℃ 加热数分钟，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应不显相同颜色的荧光斑点。

若检出与白麻苷对照品相同颜色的荧光斑点，建议用液相色谱法进一步确认。

（2）照高效液相色谱法（中国药典2015年版四部通则0512）测定。

色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以1%冰醋酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为354nm；柱温：50℃。理论板数按白麻苷峰计算应不低于10000。

    对照品溶液的制备  取白麻苷对照品适量，精密称定，加70%甲醇制成每1ml含20µg的溶液，即得。

    供试品溶液的制备  取本品20片，糖衣片除去包衣，精密称定，研细，取约10片重，精密称定，置平底烧瓶中，精密加入70%甲醇25ml，称定重量，加热回流 30分钟，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液，即得。

    测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5µl，注入液相色谱仪，测定，即得。 

结果判断  供试品色谱图中，不得呈现与白麻苷对照品保留时间相同的色谱峰；若出现与白麻苷对照品保留时间相同的色谱峰，采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰的紫外吸收光谱，吸收光谱应不同（白麻苷对照品色谱峰在256±2nm和354±2nm处有最大吸收峰），若吸收光谱相同，则视为阳性检出。                                          

附：高效液相色谱图和白麻苷紫外光谱图

  图1 白麻苷和金丝桃苷混合对照品溶液 HPLC色谱图

图2含大花罗布麻叶供试品HPLC色谱图

图3  含罗布麻叶供试品HPLC色谱图

图4白麻苷紫外光谱扫描图