【检查】南五味子 照高效液相色谱-质谱法(中国药典2015年版四部通则0512和通则0431)测定。
色谱条件 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以10mmol/L乙酸铵溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;流速为0.25ml/min。
时间(min) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~2 | 10 | 90 |
2~16 | 10→60 | 90→40 |
16~17 | 60→90 | 40→10 |
17~20 | 90 | 10 |
20~20.5 | 90→10 | 10→90 |
20.5~24 | 10 | 90 |
质谱条件与系统适用性试验
采用电喷雾电离源(ESI),分段采集,五味子醇甲出峰时间段采用正离子方式扫描,安五脂素出峰时间段采用负离子方式扫描,多反应监测(MRM);
系统适用性试验选择质荷比(m/z)433.2→415.2和m/z433.2→384.1作为五味子醇甲检测离子对,质荷比(m/z)m/z327.2→312.1和m/z327.2→121.0作为安五脂素检测离子对。取对照品溶液,进样1μl,按上述检测离子对的MRM色谱峰的信噪比均应大于3:1。
供试品溶液的制备 取本品水蜜丸,研碎,取6g,精密称定;或取大蜜丸或小蜜丸,剪碎,取9g,精密称定;或取重量差异项下大蜜丸,剪碎,取9g,精密称定;精密加入甲醇50ml,称定重量,加热回流1小时,放冷,称定重量,用甲醇补足减失的重量,滤过,精密吸取续滤液1ml,置10ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
对照品溶液的制备 取五味子醇甲、安五脂素对照品适量,精密称定,加甲醇配制成浓度为0.01~2μg/ml的系列混合对照品溶液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1μl,注入高效液相色谱-串联质谱联用仪,测定,即得。
结果判断 本品含安五脂素(C20H24O4)含量与五味子醇甲(C24H32O7)含量的比值,不得大于2.0。