【检查】盐酸异丙嗪有关物质  精密量取本品10ml，置25ml量瓶中（处方2）或50ml量瓶中（处方1），用流动相A-流动相B（75:25）稀释刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，用流动相A-流动相B（75:25）稀释至刻度，作为对照溶液；分别精密称取盐酸异丙嗪对照品、盐酸异丙嗪杂质A对照品、杂质B对照品、杂质C对照品、杂质D对照品适量，加少量甲醇使溶解，用流动相A-流动相B（75:25）稀释制成浓度分别为2.0μg/ml 、0.2μg/ml、1.6μg/ml、0.4μg/ml、0.2μg/ml的混合溶液，作为对照品溶液。照高效液相色谱法（中国药典2015年版四部 通则0512）测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以 0.01mol/L磷酸氢二铵溶液（磷酸调节pH值至7.0）为流动相A，乙腈为流动相B，按下表梯度洗脱；检测波长249nm，柱温30℃。精密量取供试品溶液、对照溶液、对照品溶液各20ul注入液相色谱仪，记录色谱图。异丙嗪与相邻色谱峰之间分离度应符合规定。色谱图中如有与杂质A、B、C、D保留时间相同的色谱峰，按外标法以峰面积计算；如有其他杂质，与对照溶液比较按比例计算。

HPLC梯度洗脱程序