【检查】照高效液相色谱法（中国药典2015年版四部通则0512）和质谱法（中国药典2015年版四部通则0431）测定。
色谱、质谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（色谱柱粒径2.2μm）；以乙腈为流动相A，水为流动相B，按表1中的规定进行梯度洗脱；流速为0.3ml/min。采用质谱检测器，电喷雾负离子模式（ESI-），进行多反应检测（MRM），选择m/z943.5→797.3、m/z943.5→635.3和m/z943.5→781.3为检测离子对。对照品溶液（进样体积：5μl）中柴胡皂苷Nepasaikosaponin k的色谱峰（m/z943.5→797.3）信噪比应大于10:1。
时间（分钟） | 流动相A（%） | 流动相B（%） |
0～5 | 15→25 | 85→75 |
5～30 | 25→30 | 75→70 |
30～35 | 30→90 | 70→10 |
35～36 | 90→15 | 10→85 |
36～40 | 15 | 85 |
对照品溶液的制备 取Nepasaikosaponin k对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.5μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 取样品适量，研细，取约7g或3g（无蔗糖），精密称定，精密加入含5%浓氨试液的甲醇溶液50ml，称定重量，超声处理（功率500W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用含5%浓氨试液的甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，用0.22μm微孔滤膜滤过，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入高效液相色谱-质谱联用仪，测定，即得。
判定原则 （1）供试品的提取离子流色谱中，未同时检出对照品溶液色谱相应的色谱峰，视为未检出；（2）供试品的提取离子流色谱中，同时检出对照品溶液色谱相应的色谱峰，且供试品色谱中m/z943.5→797.3的色谱峰面积值不大于对照品溶液中相应的峰面积值者，视为未检出；（3）供试品的提取离子流色谱中，同时检出对照品溶液色谱相应的色谱峰，且供试品色谱中m/z943.5→797.3的色谱峰面积值大于对照品溶液中相应的峰面积值者，视为检出。
结果判断 供试品的提取离子流色谱中，应不得检出对照品溶液色谱相应的色谱峰。
