一、 仪器与试药
仪器:HITACHI高效液相色谱仪(型号:Chromaster,检测器:DAD);电子天平(生产商:METTLER TOLEDO公司,型号:MS 205DU)
试剂:乙腈为色谱纯,磷酸二氢钠为分析纯,纯化水。
对照品信息见下表:
表 各对照品信息来源
名称 | 含量(%) | 批号 | 来源 |
醋酸氯已定 | 96.9 | 100183-201604 | 中国食品药品检定研究院 |
山梨酸 | 99.6 | 190126-201501 | 中国食品药品检定研究院 |
苯甲酸 | 99.9 | 100419-201703 | 中国食品药品检定研究院 |
三氯叔丁醇 | 98.0 | DST200725 | 乐美天医药-德思特生物 |
羟苯甲酯 | 99.6 | 100278-201103 | 中国食品药品检定研究院 |
羟苯乙酯 | 100.0 | 100847-201203 | 中国食品药品检定研究院 |
羟苯丙酯 | 99.0 | TAO719CB13 | 源叶生物 |
苯扎溴铵 | 95.2 | 23716 | BePure |
硫柳汞钠 | 99.8 | 26004 | BePure |
苯甲醇 | 99.9 | 190019-201903 | 中国食品药品检定研究院 |
二、 色谱条件
色谱柱:C18色谱柱(Agela Technologies,Venusil MP C18 4.6*250mm,5µm);流动相:流动相A:0.1mol/L磷酸二氢钠(用磷酸调节pH值至3.7),流动相B:乙腈;流速:1.0ml/min;柱温:35℃;检测波长:214nm;进样体积:20µL。
洗脱梯度表
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0 | 80 | 20 |
5 | 80 | 20 |
18 | 55 | 45 |
21 | 20 | 80 |
31 | 20 | 80 |
33 | 80 | 20 |
38 | 80 | 20 |
图1. 空白溶剂色谱图
1.苯甲醇2.苯甲酸3.山梨酸4.羟苯甲酯5.醋酸氯已定6.羟苯乙酯7.硫柳汞钠8.三氯叔丁醇9.羟苯丙酯10.苯扎溴铵
图2. 防腐剂对照品色谱图
三、测定方法
1. 供试品溶液的制备:精密量取本品2ml置25ml量瓶中用20%的乙腈溶液稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。
2. 对照品溶液:精密称取各抑菌剂对照品10mg置50ml量瓶中,用20%的乙腈溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品储备液,再用20%的乙腈溶液稀释至与供试品相同浓度,作为对照品溶液。
取上述供试品溶液和对照品溶液各20μl,按上述色谱条件测定。