【检查】有关物质 照高效液相色谱法（中国药典2020年版四部通则0512）测定。

供试品溶液  取本品适量，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.5mg的溶液。

对照溶液  精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。

空白辅料溶液  精密量取50%乙醇溶液5ml, 置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。

对照品溶液  取泼尼松龙对照品适最，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含5μg的溶液。

系统适用性溶液  取氢化可的松与泼尼松龙适量，加甲醇溶解并稀释制成每1ml 中约含5μg 的溶液。

色谱条件  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18柱，4.6×250mm，5μm或效能相当的色谱柱）；以乙腈为流动相A，水为流动相B，按下表进行线性梯度洗脱；流速为每分钟0.8ml；检测波长为245nm；进样体积20μl。

系统适用性要求  系统适用性溶液色谱图中，出峰顺序依次为泼尼松龙与氢化可的松，泼尼松龙峰与氢化可的松峰之间的分离度应符合要求。

测定法  精密量取供试品溶液、对照溶液与对照品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至供试品溶液主成分峰保留时间的3倍。

限度  供试品溶液色谱图中如有与泼尼松龙保留时间一致的峰，按外标法以峰面积计算，不得过0.5%；其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍(0.5%)，杂质总量不得过2.0%，小于对照溶液主峰面积0.01倍的峰忽略不计。