【检查】西贝母碱苷和西贝母碱 照高效液相色谱法（《中国药典》2015年版四部通则0512）测定

色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，0.08%二乙胺为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；蒸发光散射检测器检测。理论板数按西贝母碱苷峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备 分别取西贝母碱苷对照品和西贝母碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml各含0.2mg的混合溶液，即得。

参比溶液的制备 取西贝母碱苷对照品和西贝母碱对照品，精密称定，分别加甲醇制成每lml含35μg和20μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备 取本品粉末约6g，精密称定，至圆底烧瓶中，加浓氨试液5ml浸润，放置1小时，精密加入三氯甲烷-甲醇（4:1）的混合溶液50ml，混匀，置80℃水浴中加热回流2小时，放冷，滤过，蒸干，残渣加甲醇定容至2ml，摇匀，滤过，即得。

测定法 分别精密吸取对照品溶液、参比溶液和供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

判定原则（1）供试品色谱中，未出现或只出现一个与对照品溶液色谱相应的色谱峰，视为未检出；（2）供试品色谱中，同时出现与对照品溶液色谱相应的色谱峰，且色谱峰面积值至少有一个未大于参比溶液相应的峰面积值者，视为未检出；（3）供试品色谱中，同时出现与对照品溶液色谱相应的色谱峰，且色谱峰面积值均大于参比溶液相应的峰面积值者，视为检出；

结果判定  供试品色谱中，应不得检出与对照品溶液色谱相应的色谱峰。 

备注：必要时采用高效液相色谱-质谱联用的方法验证。（参照流动相为0.1%甲酸和10mmol·L^-1甲酸铵水溶液（A）-乙腈溶液（B）系统）