【含量测定】人参 照高效液相色谱法(中国药典2020年版通则0512)和质谱法(中国药典2020年版通则0431)测定。
色谱、质谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(100mm×2.1mm×1.9μm),以乙腈-四氢呋喃-20mmol/L甲酸铵溶液(22.5:2.5:75)为流动相,流速为0.3ml/min。采用质谱检测器,电喷雾负离子模式(ESI-),扫描方式多反应监测(MRM)。其他质谱参数见下表。
表 人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rb1质谱参数
化合物 | 保留时间/min | 扫描方式 | 母离子(m/z) | 子离子(m/z) | 碰撞能量(V) |
人参皂苷Rg1 | 2.69 | 负离子 | 845.5 | 799.4* | 25 |
845.5 | 637.4 | 33 | |||
人参皂苷Re | 2.79 | 负离子 | 945.5 | 637.44 | 43 |
945.5 | 475.3* | 55 | |||
人参皂苷Rf | 13.63 | 负离子 | 845.5 | 799.4* | 18 |
845.5 | 637.3 | 38 | |||
845.5 | 475.3 | 45 | |||
人参皂苷Rb1 | 21.52 | 负离子 | 1107.6 | 945.5* | 47 |
1107.6 | 783.4 | 58 |
*:定量离子对
混合对照品溶液的制备 精密称取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rf对照品、人参皂苷Rb1对照品适量,加甲醇制成每1ml含人参皂苷Rg1 3.8μg、人参皂苷Re 4.0μg、人参皂苷Rf 2.6μg、人参皂苷Rb1 3.9μg的混合对照溶液。
供试品溶液的制备 取本品水蜜丸适量,研碎,取约1.0g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入50%甲醇25ml,密塞,称定重量,超声处理(功率500W,频率37kHz)30分钟,放冷,再称定重量,用50%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入高效液相色谱-质谱联用仪,测定,即得。
本品含人参以人参皂苷Rg1(C42H72O14)和人参皂苷Re(C48H82O18)的总量以及人参皂苷Rb1(C54H92O23)含量、人参皂苷Rf(C42H72O14)含量计,水蜜丸每1g含人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的总量不得少于23.08µg,人参皂苷Rb1不得少于15.39µg,人参皂苷Rf不得少于14.88µg。