更年宁中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rb1的含量测定方法

发布时间:2023-03-14

【含量测定】人参 照高效液相色谱法(中国药典2020年版通则0512)和质谱法(中国药典2020年版通则0431)测定。

色谱、质谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(100mm×2.1mm×1.9μm),以乙腈-四氢呋喃-20mmol/L甲酸铵溶液(22.5:2.5:75)为流动相,流速为0.3ml/min。采用质谱检测器,电喷雾负离子模式(ESI-),扫描方式多反应监测(MRM)。其他质谱参数见下表。

表 人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rb1质谱参数

化合物

保留时间/min

扫描方式

母离子(m/z)

子离子(m/z)

碰撞能量(V)

人参皂苷Rg1

2.69

负离子

845.5

799.4*

25

845.5

637.4

33

人参皂苷Re

2.79

负离子

945.5

637.44

43

945.5

475.3*

55

人参皂苷Rf

13.63

负离子

845.5

799.4*

18

845.5

637.3

38

845.5

475.3

45

人参皂苷Rb1

21.52

负离子

1107.6

945.5*

47

1107.6

783.4

58

*:定量离子对

混合对照品溶液的制备  精密称取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rf对照品、人参皂苷Rb1对照品适量,加甲醇制成每1ml含人参皂苷Rg1 3.8μg、人参皂苷Re 4.0μg、人参皂苷Rf 2.6μg、人参皂苷Rb1 3.9μg的混合对照溶液。

供试品溶液的制备  取本品水蜜丸适量,研碎,取约1.0g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入50%甲醇25ml,密塞,称定重量,超声处理(功率500W,频率37kHz)30分钟,放冷,再称定重量,用50%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入高效液相色谱-质谱联用仪,测定,即得。

本品含人参以人参皂苷Rg1(C42H72O14)和人参皂苷Re(C48H82O18)的总量以及人参皂苷Rb1(C54H92O23)含量、人参皂苷Rf(C42H72O14)含量计,水蜜丸每1g含人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的总量不得少于23.08µg,人参皂苷Rb1不得少于15.39µg,人参皂苷Rf不得少于14.88µg。