【含量测定】 照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部通则0512)测定。
色谱条件与系统适应性 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1%磷酸水溶液为流动相B，按下表1中的规定进行梯度洗脱；紫外检测器，变波长条件如下表2，色谱柱Kromasil-100-5-C18（5um,4.6*250mm），流速为1.0ml/min；柱温为30℃。理论板数按哈巴俄苷峰计算分别为不低于5000。
表1 梯度洗脱条件
时间（分钟） | A-乙腈（%） | B-0.1%磷酸（%） |
0～10 | 3 | 97 |
10～11 | 3→15 | 97→85 |
11～20 | 15→20 | 85→80 |
20～50 | 20→60 | 80→40 |
50～51 | 60→80 | 40→20 |
51～68 | 80 | 20 |
68～70 | 80→5 | 20→97 |
表2 变波长条件
时间（分钟） | A（nm） |
0 | 210 |
6 | 272 |
13 | 245 |
18 | 230 |
22.5 | 320 |
28 | 278 |
50 | 210 |
对照品溶液的制备 分别取没食子酸、芍药苷、芦丁、黄芩苷、哈巴俄苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含没食子酸100μg、芍药苷20μg、芦丁20μg、黄芩苷10μg、哈巴俄苷10μg的混合溶液，摇匀，即得。
供试品溶液制备 取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，取约2.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量,超声处理（功率250W，频率35kHz）60分钟,放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5µl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每片含牡丹皮及青果以没食子酸（C7H6O5）计，不得少于0.14mg；含牡丹皮以芍药苷（C23H28O11)计，不得少于0.012mg；含款冬花以芦丁（C27H30016）计，不得少于0.027mg。含木蝴蝶以黄芩苷（C21H18O11）计，不得少于0.0075mg。含玄参以哈巴俄苷（C24H30O11）计，不得少于5.85μg。
