【含量测定】 照高效液相色谱法（中国药典 2020 年版四部通则 0512）测定

色谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流 动相 A，0.2%甲酸溶液为流动相 B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长 为 280nm；柱温为 30 ℃；流速：0.5ml/min。

时间 流动相 A 流动相 B 0→30 5→10 95→90 30→80 10→18 90→82 80→135 18→24 82→76 135→138 24→5 76→95 138→150 5 95

参照物溶液的制备 取葛根素对照品适量，精密称定，加 60%甲醇制成 1ml 含 0.1mg 的溶液，即得。 供试品溶液的制备 取装量差异项下的本品内容物，研细，取 1g，精密称 定，置具塞锥形瓶中，精密加入 60%甲醇 25 ml，密塞，称定重量，超声处理 (功 率 300 W，频率 50 kHz) 30 分钟，放冷，再称定重量，用 60%甲醇补足减失的重 量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10μl，注入液相色谱 仪,测定，即得。以葛根素对照品为参照，以其相应的峰为 S 峰，计算丹参素 钠、丹酚酸 B、2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D 葡萄糖苷、甘草苷的相对 保留时间，其相对保留时间应在规定值的±5%范围之内。保留时间及校正因子 详见表 1。 表 1 保留时间及校正因子

待测成分 (峰) 相对保留时间 校正因子 丹参素钠 0.40 2.507 甘草苷 1.52 0.947 2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D 葡萄糖苷 2.41 0.866 丹酚酸 B 0.40 1.478

以葛根素对照品为对照，分别乘以校正因子，计算丹参素钠和丹酚酸 B 的总 量、2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D 葡萄糖苷、甘草苷、葛根素的含量。 本品每粒含丹参以丹参素钠（C9H11NaO5）与丹酚酸B（C36H30O16）总量计，不 得少于0.38mg；每粒含葛根以葛根素（C21H20O9）计，不得少于0.38mg；每粒含 制何首乌以2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷（C20H22O9）计，不得 少于0.05mg；每粒含甘草以甘草苷（C21H22O9）计，不得少于0.05mg。